通过两步法供氧策略提高发酵生产L-精氨酸产量的方法

摘要

通过两步法供氧策略提高发酵生产L-精氨酸产量的方法，属于发酵工程技术领域。本发明在钝齿棒杆菌(Corynebacterium crenatum)SYPW发酵生产L-精氨酸过程中，0～24h控制转速600r/min，24-30h控制转速550r/min，30-36h控制转速500r/min，36-42h控制转速450r/min，42h后控制转速400r/min，并维持到发酵结束。本发明提出了一种新的两步法供氧策略(NOS)0～24h，控制转速600r/min，然后每6h转速下降50r/min直至转速达到400r/min，并维持到发酵结束。运用新的供氧策略后，L-精氨酸的产量比高供氧(HOS)和中供氧(MOS)分别增加了16％和51％，而且，葡萄糖的消耗速率明显增加，发酵周期仅为81h，比HOS条件下提前了6h。

主权项

1、一种通过两步法供氧策略提高发酵生产L-精氨酸产量的方法，其特征在于在钝齿棒杆菌Corynebacterium crenatum SYPW发酵生产L-精氨酸过程中，0～24h控制转速600r/min，24-30h控制转速550r/min，30-36h控制转速500r/min，36-42h控制转速450r/min，42h后控制转速400r/min，并维持到发酵结束；摇瓶培养：摇瓶种子培养基以g/L计：葡萄糖30，玉米浆20，(NH4)2SO4 20，KH2PO4 1，MgSO4·7H2O 0.5，尿素1.5，pH7.0～7.2，121℃灭菌20min，装液量30mL/250mL；培养方法：斜面活化培养：31℃培养20～24h；种子培养：从斜面上挑取一环菌体接入种子培养基，31℃，于往复摇床上110r/min，培养15-16h；发酵罐培养：罐上发酵培养基以g/L计：葡萄糖150，玉米浆4，(NH4)2SO420，KH2PO4 1.5，MgSO4·7H2O 0.5，FeSO4·7H2O 0.02，MnSO4·H2O 0.02，生物素8×10-5，L-组氨酸5×10-4，氨水控制pH7.0～7.2，121℃灭菌10min；装液量3L/5L发酵罐；培养方法：5L自控发酵罐分批发酵：5L发酵罐中装液量3L，接种量5％，31℃，通风量3L/min，流加氨水控制pH在6.8，通过豆油消泡，溶氧自动显示，通过控制所述的搅拌转速来实现供氧差异。