一种用于细胞水平高内涵药物筛选的方法

摘要

一种用于细胞水平高内涵药物筛选的方法，即使用专用的集成化微流控芯片进行细胞水平高内涵药物筛选。本发明创造性的在芯片上大规模集成了药物浓度梯度生成、分配、芯片细胞培养、受激、洗涤、标记等样品前处理过程。与传统的多孔板技术相比，省去了配制和分配不同浓度药物溶液的繁冗操作，大大简化细胞接种、受激、洗涤和标记操作过程，显著降低了细胞和试剂耗量，并可一次运行获得多种药物，每种药物多个浓度条件，每个浓度条件多个细胞参数的筛选结果。

主权项

1、一种用于细胞水平高内涵药物筛选的方法，其特征在于：使用专用的集成化微流控芯片进行细胞水平高内涵药物筛选；所述的集成化微流控芯片由2～99个相同的结构单元构成，这些结构单元之间通过一个公共样品池相连接；每个结构单元含有一个浓度梯度生成器和一个阵列化细胞培养模块；浓度梯度生成器的最上端为药物入口和培养基入口；方法过程为：将细胞悬液加入位于芯片中央的公共样品池中，芯片置于显微镜下观察，当细胞在静压力驱动下流入细胞培养室后，调整样品池中细胞悬液的体积，使之与浓度梯度生成器入口的溶液液面等高，芯片中细胞不再流动，停驻于细胞培养室中；将接种了细胞的微流控芯片放入细胞培养箱中培养，然后将芯片置于显微镜下观察细胞的贴壁情况；细胞贴壁后，向浓度梯度生成器的药物入口和培养基入口分别加入等体积的被筛选药物和细胞培养基，药物的浓度梯度生成后，公共样品池连接注射泵使芯片中的液体从浓度梯度生成器流向阵列化细胞培养模块，芯片置于细胞培养箱中；12～72小时后，断开公共样品池与注射泵的连接，然后向公共样品池中加入洗涤溶液，在静压力驱动下，洗涤液流入细胞培养室对细胞进行洗涤；向公共样品池中加入标记溶液，在静压力驱动下，标记溶液流入细胞培养室对细胞进行标记；最后，将微流控芯片置于荧光显微镜下，进行细胞对药物响应参数的检测。