| 发明名称 | 零背景构建重组杆状病毒的方法 | ||
| 摘要 | 本发明是一种零背景构建重组杆状病毒的方法。具体步骤为：(1)构建以R6Kγ作为复制子的供体质粒，并按常规方法引入外源基因；(2)封闭DH10Bac宿主菌基因组上的attTn7受体位点，获得DH10BacΔTn7；(3)常规方法转化重组供体质粒进入DH10BacΔTn7获得重组杆状病毒；(4)常规方法制备重组Bacmid DNA转染昆虫细胞。本发明利用以R6Kγ为复制子构建条件限制型供体质粒，同时封闭DH10Bac宿主菌基因组上的attTn7重组位点，只需常规转化即可获得重组杆状病毒，并且由于其超过99％的阳性重组率，无须复杂的PCR验证和繁琐的空斑纯化，做到零背景真正高效快速的构建重组杆状病毒，促进杆状病毒表达系统的广泛利用。 | ||
| 申请公布号 | CN101372685A | 申请公布日期 | 2009.02.25 |
| 申请号 | CN200810140644.5 | 申请日期 | 2008.07.16 |
| 申请人 | 南阳师范学院 | 发明人 | 张二辉;姚伦广;孙京臣;刘宗才;张红玲 |
| 分类号 | C12N7/01(2006.01);C12N15/866(2006.01) | 主分类号 | C12N7/01(2006.01) |
| 代理机构 | 郑州红元帅专利代理事务所（普通合伙） | 代理人 | 徐皂兰 |
| 主权项 | 1.一种零背景构建重组杆状病毒的方法，其特征在于：该构建方法按下列步骤进行：(1)构建以R6Kγ作为复制子的供体质粒，并按常规方法引入外源基因；(2)封闭DH10Bac宿主菌基因组上的attTn7受体位点，获得DH10Bac△Tn7；(3)常规方法转化重组供体质粒进入DH10Bac△Tn7获得重组杆状病毒；(4)常规方法制备重组Bacmid DNA转染昆虫细胞。 | ||
| 地址 | 473061河南省南阳市卧龙路1386号 | ||