植物叶际微生物基因组DNA提取方法

摘要

本发明属于生物技术领域，涉及一种可用于PCR扩增的植物叶际微生物基因组DNA提取方法。将叶子样品浸泡在灭菌的磷酸盐缓冲液中，经恒温摇床震荡和超声波处理使叶际微生物与植物叶子分离，收集好的菌体用0.1％的焦磷酸钠和洗涤缓冲液分别洗涤，然后依次用适量的溶菌酶、蛋白酶K和SDS处理，裂解细胞使DNA释放出来，最后经氯仿抽提蛋白，异丙醇沉淀即得到高质量的可直接用于PCR扩增的植物叶际基因组DNA。

主权项

1.一种可直接用于PCR扩增的植物叶际微生物基因组DNA的提取方法，其特征在于，提取步骤包括：将植物叶片样品浸泡在灭菌的磷酸盐缓冲液中，摇床震荡处理10—30min，然后用超声波处理2—8min，使叶片上附生的微生物与叶片分离；离心收集菌体，用0.1％的焦磷酸钠和洗涤缓冲液分别洗涤两次；裂解液中分别加入溶菌酶、蛋白酶K和十二烷基硫酸钠处理，使菌体裂解释放出DNA；然后经氯仿抽提蛋白，异丙醇沉淀即得到高质量的可直接用于PCR扩增的植物叶际基因组DNA。