发明名称 |
一种快速提取和纯化植物病组织中病原菌DNA的方法 |
摘要 |
本发明公开了一种快速提取和纯化植物病组织中病原菌DNA的方法,将植物不同发病部位的组织加入提取液,用尖头玻棒研磨后,上清液加入无水乙醇沉淀DNA,再用70%乙醇洗涤干燥,最后通过过柱纯化得到植物组织中病原物的基因组DNA。提取液的组分以提取液总体积计:PVP:1-2g/100ml,Tris-HCl:200mM,EDTA:50mM,NaCl:20mM,SDS:1g/100ml,余量为ddH<SUB>2</SUB>O,pH8.0。本发明的方法具有简单、污染小、快速、经济、高效等优点,能够实现多个样品短时间内提取DNA,给病害分子检测提供了便捷、快速的途径。 |
申请公布号 |
CN101367858A |
申请公布日期 |
2009.02.18 |
申请号 |
CN200810121328.3 |
申请日期 |
2008.09.25 |
申请人 |
浙江大学 |
发明人 |
严蕾艳;马忠华;尹燕妮 |
分类号 |
C07H21/04(2006.01);C12N15/10(2006.01) |
主分类号 |
C07H21/04(2006.01) |
代理机构 |
杭州天勤知识产权代理有限公司 |
代理人 |
胡红娟 |
主权项 |
1.一种快速提取和纯化植物病组织中病原菌DNA的方法,按如下步骤进行:(1)取待测植物病组织,加入提取液后进行研磨,使组织破碎,再加入提取液,混匀后静置;(2)将步骤(1)所得的混合液离心,分离得到上清液后加入无水乙醇,再次离心得到沉淀的DNA;(3)将沉淀的DNA用70%乙醇洗涤,干燥后溶于无菌水,即为提取的DNA;(4)将提取的DNA溶液过柱纯化。 |
地址 |
310027浙江省杭州市西湖区浙大路38号 |