一种重组合神经替代物的制备方法

摘要

一种重组合神经替代物的制备方法，本发明是以异种动物去细胞神经为支架，注入复合有神经营养因子的控制释放微球，构成重组合神经替代物，并建立有利于神经再生的微环境，促进神经再生。本发明具有制备周期短、成本低、材料来源广泛、方法简便、易于操作的优点；使所获得的重组合神经替代物具有良好的三维空间结构，低免疫排斥反应，重建神经再生的微环境，可以达到保护神经元，引导轴突再生的效果，在医用生物材料技术领域用于修复周围神经缺损，具有广阔的应用前景。

主权项

1.一种重组合神经替代物的制备方法，其特征在于，是按以下操作步骤制备：1)去细胞神经支架的制备将哺乳动物的周围神经去除表面组织后，用无菌生理盐水冲洗，再用高渗盐溶液浸泡后，用无菌蒸馏水和磷酸盐缓冲液依次反复浸洗，然后用含有0.15％重量体积比的过氧乙酸、0.01％重量体积比的乙二胺四乙酸和1％重量体积比的曲拉通X200的磷酸盐缓冲液浸泡去除神经内细胞成分，再用0.5％浓度的戊二醛溶液浸泡10～30分钟，以磷酸盐缓冲液清洗后经辐射照射得到去细胞神经支架，4℃保存备用；2)神经营养因子控制释放微球的制备利用可降解材料制备纳米微球，其直径在10nm～10μm之间；另构建神经再生室，从中提取神经营养因子，将其与纳米微球混合，混合的重量比为0.1～2.0％，使神经营养因子吸附到纳米微球内部，冻干后即形成复合有神经营养因子的控制释放微球；3)重组合神经替代物的制备将I型胶原凝胶溶液在冰浴下调节pH值至7.2-7.4，加入复合有神经营养因子纳米微球，终浓度为100mg/ml，混匀后将其注入去细胞神经支架中，形成凝胶后，冷冻干燥后即形成重组合神经替代物。