壳聚糖树脂固定化酶纯化大豆乳清废水中胰蛋白酶抑制剂的工艺

摘要

本发明研究了壳聚糖树脂固定化酶纯化大豆乳清废水中胰蛋白酶抑制剂的工艺，属轻工、食品及环境工程领域。大豆乳清是工业上采用碱溶、酸沉工艺生产大豆蛋白的副产物，其中含有大量胰蛋白酶抑制剂等功能性成分。据统计，国内大豆分离蛋白生产企业每年排放大豆乳清废弃液在300万吨以上。目前，从大豆乳清废水中提取活性物质研究较为成熟的是大豆低聚糖等的提取，而对于其中胰蛋白酶抑制剂的分离纯化尚未受到充分重视。本发明是利用制备的多孔、立体网状结构的壳聚糖微球树脂，经活化偶联胰蛋白酶后，亲和吸附大豆乳清废水中的胰蛋白酶抑制剂，经洗脱可得电泳纯胰蛋白酶抑制剂。该方法可高值化利用提取大豆蛋白后的废弃物，操作简单，成本低，易于工业化推广应用。

主权项

1.壳聚糖树脂固定化酶纯化大豆乳清废水中胰蛋白酶抑制剂的特征工艺流程如下：将壳聚糖溶于醋酸溶液中，控制温度，分别加入液体石蜡、司班、乙酸乙酯、甲醛、戊二醛，调节pH，反应3～4小时，再加入硼氢化钠溶液，继续反应1～1.5小时，减压抽滤、洗涤，真空干燥，即得壳聚糖微球树脂。将壳聚糖树脂置于NaOH溶液中，加入环氧氯丙烷为活化剂，活化树脂；活化树脂加入胰蛋白酶进行偶联，减压抽滤、真空干燥，即得壳聚糖树脂固定化胰蛋白酶。将固定化酶树脂装柱，以乳清废弃液过柱，洗脱，收集活性部分冷冻干燥，得到电泳纯大豆胰蛋白酶抑制剂。