发明名称 |
一种在TiO<SUB>2</SUB>表面固定肝素多层膜的方法 |
摘要 |
本发明公开了一种在TiO<SUB>2</SUB>表面固定肝素多层膜的方法。通过自组装单分子层方法在TiO<SUB>2</SUB>表面与生物素之间制备一层与两者分别形成化学键合的中间层,提高固定肝素多层膜的稳定性。用己二胺作为连接剂,使其分别与肝素的羧基和生物素的羧基反应而形成生物素化肝素,从而具有亲和素的识别位点。将自组装单分子层改性后的TiO<SUB>2</SUB>涂覆上叠氮化生物素,通过光化学方法在该TiO<SUB>2</SUB>表面牢固地固定生物素,利用生物素-亲和素的识别作用组装并形成肝素多层膜。该方法能在钛基金属生物材料表面TiO<SUB>2</SUB>薄层或其他材料表面沉积TiO<SUB>2</SUB>薄膜后表面牢固固定肝素多层膜,从而使其表面获得优良的抗凝血功能。且其工艺简单,实现容易。 |
申请公布号 |
CN101361992A |
申请公布日期 |
2009.02.11 |
申请号 |
CN200810046049.5 |
申请日期 |
2008.09.12 |
申请人 |
西南交通大学 |
发明人 |
黄楠;翁亚军;王进;杨苹;冷永祥;陈俊英;孙鸿;万国江;赵安莎;游天雪;吴熹 |
分类号 |
A61L33/10(2006.01) |
主分类号 |
A61L33/10(2006.01) |
代理机构 |
成都博通专利事务所 |
代理人 |
陈树明 |
主权项 |
1.一种在TiO2表面固定肝素多层膜的方法,其步骤为:A、生物素化肝素的制备在浓度为50mM的MES溶液中依次加入肝素、NHS和EDC,使肝素中羧基量、NHS和EDC三种物质的量的比为1:0.6:1,再按己二胺与肝素中羧基的物质的量之比为1.2:1,加入己二胺,反应后透析除去小分子,得到肝素-己二胺溶液;另将物质的量与己二胺相等的生物素,加入到浓度为50mM的MES溶液中,再依次向其中加入NHS和EDC,使生物素、NHS和EDC三种物质的量之比为1:0.6:1,即得到生物素活化液;将生物素活化液加入到肝素-己二胺溶液中,反应后透析除去小分子,然后冷冻干燥,得到生物素化肝素;B、有机膦酸单分子层的自组装将洁净的TiO2材料浸泡在温度为50~120℃、浓度为1~50mmol/L的有机膦酸或磷酸单酯溶液中进行TiO2表面的单分子层自组装,浸泡时间为1~24小时,取出TiO2后清洗;C、固定生物素将B步得到的单分子层自组装后的TiO2,放入浓度为0.1~0.6mg/ml叠氮化生物素(photobiotin)的乙醇溶液中,表面完全润湿后,取出、阴干,紫外光照射1~10分钟使生物素固定在TiO2表面;D、组装亲和素将C步得到的固定了生物素的TiO2浸泡在浓度为0.1~1mg/ml的亲和素溶液中组装0.5~24小时;E、固定肝素膜将A步所制得的生物素化肝素配置成浓度为1~10mg/ml的溶液,再将D步得到的组装了亲和素的TiO2置于该溶液中组装0.5~24小时,获得肝素膜;F、重复D、E两步的操作,获得固定了1~50层肝素膜的TiO2。 |
地址 |
610031四川省成都市二环路北一段111号 |