转谷氨酰胺酶介导的生长激素的结合

摘要

一种用于PEG化生长激素的方法，所述方法包含使生长激素与包含亲核试剂的胺反应，其进一步包含在TGase存在下的第一官能团以形成氨基转移化的生长激素，随后使所述氨基转移化的生长激素与已经用第二官能团官能化的PEG反应，其中对所述第一和第二官能团进行选择，使得它们能够反应以形成共价键。

主权项

1、一种将PEG共价连接到包含至少一个谷氨酰胺残基的多肽上的方法，所述方法包含在一个或者多个步骤中使含有式[I]表示的多肽的所述谷氨酰胺残基其中PP表示通过从存在于多肽中的谷氨酰胺残基的侧链上除去-C(＝O)-NH₂获得的多肽基团，与式[II]的含氮亲核试剂H₂N-D-R-X[II]其中D表示-O-或者单键；R表示C_1-6亚烷基、-(CH₂)₄-CH(NH₂)-CO-NH-CH₂-、-(CH₂)₄-CH(NHCOCH₃)-CO-NH-CH₂-或者C_5-15杂亚烷基；X表示-O-NH₂、醛、酮，或者通过进一步反应可以转化为-O-NH₂、醛或者酮的潜在基团；在转谷氨酰胺酶存在下反应，从而形成式[III]的氨基转移化的多肽任选地，如果X为潜在基团，将所述潜在基团转化为-O-NH₂、醛或者酮，所述氨基转移化的多肽进一步与式[IV]的第二化合物反应Y-Z[IV]其中Y，如果X表示醛、酮，或者通过进一步反应可以转化为醛或者酮的潜在基团，表示-O-NH₂；或者，如果X表示-O-NH₂，或者通过进一步反应可以转化为-O-NH₂的潜在基团，表示醛或者酮；和Z表示选自以下的部分：和其中，除非另有说明，mPEG表示分子量为5kDa～40kDa的mPEG，和PEG表示分子量为1kDa～10kDa的PEG；条件是如果Z为那么PEG为10kDa PEG，从而形成式[V]的PEG化的多肽其中A表示肟键；或者其任何药学上可接受的盐、前药或溶剂化物。