海藻酸钠－聚乙烯醇固定腈水合酶菌株的方法

摘要

海藻酸钠-聚乙烯醇固定腈水合酶菌株的方法，它涉及一种固定腈水合酶菌株的方法。本发明解决了现有方法固定的腈水合酶菌株酶活损失大、反应批次少的问题。本发明方法如下：将海藻酸钠、聚乙烯醇、腈水合酶菌悬液、硅藻土和活性炭混合均匀后滴入含CaCl₂的饱和硼酸溶液中，得到的小球在温度为4℃的条件下固化24h，再滤出小球，然后将滤出的小球放入戊二醛溶液中交联20min。本发明方法得到的海藻酸钠-聚乙烯醇固定化小球的相对酶活比海藻酸钠包埋法提高了24.8％，比聚乙烯醇包埋法提高了30.8％。同时，采用海藻酸钠-聚乙烯醇固定腈水合酶菌株的方法得到的固定化腈水合酶可进行7批次连续反应，可实现工业化连续生产。

主权项

1、一种海藻酸钠-聚乙烯醇固定腈水合酶菌株的方法，其特征在于海藻酸钠-聚乙烯醇固定腈水合酶菌株的方法如下：一、将质量浓度为3.0％-4％的海藻酸钠、质量浓度为6％-9％的聚乙烯醇、浓度为50000cfu/ml～80000cfu/ml的腈水合酶菌悬液、硅藻土和活性炭混合均匀，然后将混合溶液滴入质量浓度为3.5％-8％的CaCl2的饱和硼酸溶液中，得到直径为3～4mm的小球，然后在温度为4℃的条件下将小球固化24h，再滤出小球；二、将步骤一得到的小球置于质量浓度为2％以下的戊二醛溶液中交联20min，即得海藻酸钠-聚乙烯醇固定化小球；其中步骤一中浓度为50000cfu/ml～80000cfu/ml的腈水合酶菌悬液与质量浓度为3.0％-4％的海藻酸钠的体积比为1∶10～30，浓度为50000cfu/ml～80000cfu/ml的腈水合酶菌悬液与质量浓度为6％-9％的聚乙烯醇的体积比为1∶10，浓度为50000cfu/ml～80000cfu/ml的腈水合酶菌悬液的体积与硅藻土的质量比为1ml∶0.05g～0.12g，浓度为50000cfu/ml～80000cfu/ml的腈水合酶菌悬液的体积与活性炭的质量比为1ml∶0.015g～0.025g。2、根据权利要求1所述的海藻酸钠-聚乙烯醇固定腈水合酶菌株的方法，其特征在于步骤一中所述的海藻酸钠的质量浓度为3.5％。