一种大豆异黄酮苷制备其苷元的方法

摘要

一种大豆异黄酮苷制备其苷元的方法，步骤为将鸡内金粉和0.2M/L，pH3.0～7.0的磷酸或醋酸缓冲液按1∶3～10的质量比混合，4～40℃浸提3～36h，离心弃渣，上清液添加硫酸铵或乙醇沉淀出的鸡内金酶蛋白溶于0.2M/L，pH3.0～7.0的磷酸或醋酸缓冲溶液中，得鸡内金酶液；将酶、大豆异黄酮苷及缓冲溶液混合在温度10～50℃、pH3.0～7.0的条件下反应3～30小时；提取大豆异黄酮苷元。本发明克服了酸碱水解法对苷元破坏性大，污染大，目的性差的缺点；微生物酶水解法酶活力普遍不高的缺点。发明工艺简便易行，酶解彻底而转化率高，具有较高的食用安全性。适合于工业化生产。

主权项

1.一种大豆异黄酮苷制备其苷元的方法，其特征在于包括以下工艺步骤：(1)鸡内金酶的制取：(a)鸡内金粉碎成小于20目的粒度；(b)用磷酸或醋酸缓冲液在4～30℃浸提鸡内金粉3～36h；鸡内金粉与磷酸或醋酸缓冲液的质量比为1∶6～10；离心弃渣，得上清液；(c)在上清液中添加硫酸铵至饱和或过饱和以沉淀鸡内金酶蛋白；离心弃去清液，得到鸡内金酶蛋白；(d)用磷酸或醋酸缓冲溶液溶解鸡内金酶蛋白，鸡内金酶蛋白与磷酸或醋酸缓冲溶液的质量比为1∶3～5；透析除去硫酸铵，离心弃渣，即得鸡内金酶液；(2)大豆异黄酮苷元的制备：(e)大豆异黄酮苷用磷酸或醋酸缓冲液配制成1～100g/L的工作液；(f)将鸡内金酶液和(e)的工作液按1∶0.5～5的体积比混匀后，于10～50℃进行为3～30h酶解反应；(g)酶解反应终止后，加入乙酸乙酯，酶解反应液与乙酸乙酯的体积比为1∶1～3，充分震荡萃取，静置分层，上层即为大豆异黄酮苷元乙酸乙酯溶液，下层再用乙酸乙酯萃取1～2次，合并上层制得的大豆异黄酮苷元溶液；(h)将(g)中大豆异黄酮苷元溶液通过浓缩蒸发除去乙酸乙酯后，可得到转化率60～97％相应大豆异黄酮异构体的苷元；所述磷酸或醋酸缓冲液浓度为0.2M/L，pH为3.0～7.0。