H5亚型水禽流感病毒血凝素抗体间接ELISA检测试剂盒

摘要

本发明公开了一种H5亚型水禽流感病毒血凝素抗体间接ELISA检测试剂盒。试剂盒内设有抗体检测板，酶结合物工作液，阳性对照，阴性对照，样品稀释液，10×浓缩洗涤液，显色液A，显色液B和终止液，该试剂盒的检测板为包被水禽流感H5亚型血凝素蛋白(HA)的可拆96孔酶标板，酶结合物工作液为HRP标记兔抗水禽IgG多克隆抗体，阳性对照为H5亚型水禽流感标准阳性血清，阴性对照为水禽标准阴性血清。本发明有益的积极效果是：检测试剂盒对水禽的特异性强、敏感性高、操作简单，易于大范围推广应用，具有广阔的市场前景。

主权项

1、一种H5亚型水禽流感病毒血凝素抗体间接ELISA检测试剂盒，试剂盒内设有抗体检测板，酶结合物工作液，阳性对照，阴性对照，样品稀释液，10×浓缩洗涤液，显色液A，显色液B和终止液，抗体检测板为包被水禽流感H5亚型血凝素蛋白(HA)的可拆96孔酶标板，酶结合物工作液为辣根过氧化物酶标记兔抗水禽IgG多克隆抗体，阳性对照为H5亚型水禽流感标准阳性血清，阴性对照为水禽标准阴性血清，其特征在于：所说水禽流感H5亚型血凝素蛋白的制备为利用RT-PCR技术扩增水禽流感血凝素蛋白基因序列即血凝素基因5`端1020bp的片断，将其插入到原核表达载体pET28a的下游构建pET-H5/HA表达载体，并用氯化钙法转化大肠杆菌BL21(DE3)，经1mM IPTG诱导表达，用超声波裂解细菌，表达的水禽流感病毒血凝素蛋白经商用Ni-NTA亲和层析柱纯化获得。