一种PCR引物的设计方法及其应用和试剂盒

摘要

本发明提供了一种全新的引物设计方法及其在PCR检测中的应用，以克服传统PCR检测固有的缺陷和不足，同时弥补现有国内外同类产品的诸多不足乃至方法学上无法解决的致命缺陷。根据本发明的PCR引物的设计方法，使内对照引物的退火温度低于靶序列引物的退火温度，先在高退火温下扩增并富集靶序列，再在低退火温度下扩增内对照序列，从而通过控制内对照的启动扩增时间来避免其对靶序列扩增的抑制。

主权项

1.一种PCR引物的设计方法，其特征在于，在设计引物时，使内对照引物的退火温度低于靶序列引物的退火温度，先在高退火温下扩增并富集靶序列，再在低退火温度下扩增内对照序列，从而通过控制内对照序列的启动扩增时间来避免其对靶序列扩增的抑制。