基于正选择的向日葵和油料种子的新型有效的转化方法

摘要

本发明描述了导致获得12－15％转基因植物的高度改良的、可重复性和一致的转化及再生方法。本发明涉及基于其利用木糖作为唯一糖源的能力而选择遗传转化的向日葵外植体的方法。还公开了木糖异构酶基因的核酸序列、用于并入选择标记基因的载体构建体和用载体以农杆菌介导方式转化靶宿主植物的方法，其中所述的载体包含与异源调节序列处于功能性组合下的编码木糖异构酶的基因。还公开了用所述载体转化后选择具有利用木糖作为唯一碳源的代谢优势的推测性转化体的方法。根据所述的正选择方法，观察到增加的再生效率、更好的生长和存活。发明主题减少负选择方法的劣势，如不希望的转化细胞消除和因抗生素抗性基因及除草剂抗性基因扩散引起的潜在环境损害。

主权项

1、用于选择并再生遗传转化的油料种子、更具体是向日葵植物外植体的方法，其包括：a)构建重组载体，其中所述重组载体并入与调节序列有效连接的编码选择剂木糖代谢所需的木糖异构酶的核酸序列。b)在最佳感染的条件下转化所述载体至植物外植体内的农杆菌介导的方法。c)在含有步骤a)的选择剂的MS培养基上选择推测性转化体的步骤。d)再生所选择植物外植体的步骤。