| 主权项 |
1.一种由洋刀豆制备反素 (urease)之方法 ,包含: (1)将洋刀豆粉碎去皮磨碎; (2)添加15-25%丙酮抽提液,搅拌以抽 提反素 ; (3)收集抽提液以硷液调整至硷性;同时添 加丙酮至31-35%浓度,予以热处理以除 去乳状杂质而获澄清尿素 溶液; (4)将此尿素 溶液以弱酸液调整至酸性 ,离心取沈淀; (5)以缓冲液溶解该沈淀,离心去沈淀; 及 (6)冷冻乾燥而得该尿素。2.根据申请专利范围第1 项之方法,其中该 抽提液所合丙酮之侬度以20%为佳。3.根据申请专 利范围第1项之方法,其中该 抽提液所尚含微量EDTA及2-硫氢化 乙醇。4.根据申请专利范围第3项之方法,其中该 抽提液含1 mM EDTA。5.根据申请专利范围第3项之方 法,其中该 抽提液含10-100mM2-硫氢化乙醇,以 10mM为佳。6.根据申请专利范围第1项之方法,其中 添 加的抽提液后宜于10-20℃搅拌5分钟抽 提尿素 为佳。7.根据申请专利范围第1项之方法, 其中添 加的抽提液以5倍量为最佳。8.根据申请专利范围 第1项之方法,其中该 抽提液以硷液调整至PH値8.0-9.0为佳 。9.根据申请专利范围第1或8项之方法,其 中调整该抽提液至硷性之硷液氢氧化钠。10.根据 申请专利范围第1项之方法,其中 该尿素 溶液以酸液调整至PH5.0至5.4 为佳。11.根据申请专利范围第1或10项之方法, 其中调整该尿素 溶液至酸性之弱酸液系 选自榉檬酸、醋醯、盐酸及磷酸。12.根据申请专 利范围第11项之方法,其中 该弱酸液以柠檬酸较佳。13.根据申请专利范围第1 项之方法,其中 该热处理系于40℃处理5分钟。14.符合临床检验规 格之洋刀豆尿素 ,系 根据申请专利范围第1项之方法制得,其 比活性为411单位/毫克蛋白质(240单位 /毫克乾重),自由态氨含量低于0.01微 克/单位。15.根据申请专利范围第11项之尿素 ,可 应用于检测血清中尿素含量,作为诊断肾 功能或其他疾病之重要依据。 |
