G6PD缺陷型A375稳转细胞株及其构建方法

摘要

本发明涉及到医学分子生物学技术，尤其是采用siRNA干扰技术构建研究细胞模型。本发明所述的G6PD缺陷型A375稳转细胞株是将A375细胞株经siRNA－慢病毒表达系统靶向沉默了内源性G6PD的表达量80％以上，并含有DNA双链片段以及绿色荧光蛋白GFP基因的能发绿色荧光的稳转细胞株。本申请应用siRNA－慢病毒系统沉默人皮肤恶性黑色素瘤A375细胞内源性G6PD表达80％以上，构建了G6PD缺陷型A375稳转细胞株，并对其功能进行了初步探讨。本细胞模型可用于探究G6PD与肿瘤的相关性及其机理；也可用于肿瘤细胞抗氧化应激的研究；还可作为人恶性黑色素瘤发病机理研究的模型。

主权项

1、一种G6PD缺陷型A375稳转细胞株，其特征在于是将A375细胞株经siRNA-慢病毒表达系统靶向沉默了内源性G6PD的表达量80％以上，并含有DNA双链片段5′-GATCCCGCCTCAGTGCCACTTGACATTGATATCCGTGTCAAGTGGCACTGAGGCTTTTTTCCAAC-3′和5′-TCGAGTTGGAAAAAAGCCTCAGTGCCACTTGACACGGATATCAATGTCAAGTGGCACTGAGGCGG-3′，以及绿色荧光蛋白GFP基因的能发绿色荧光的稳转细胞株。