一种利用阴离子交换柱辅助聚乙二醇修饰水蛭素的方法

摘要

一种利用阴离子交换柱辅助聚乙二醇(PEG)修饰水蛭素的方法，属于蛋白修饰技术领域。本发明的特征是采用离子交换柱辅助蛋白进行PEG修饰。反应pH为6～9，反应时间15～120min，水蛭素与PEG摩尔比1∶3～1∶9。离子交换柱为强阴离子交换柱，带电基团为季氨基。柱中基质为交联葡聚糖或琼脂糖，基质平均粒径范围30～90μm。本发明的效果和益处是简化蛋白修饰中反应和分离的步骤，相应减少各个步骤之间样品的损耗，洗脱水蛭素脱盐后可以回收。与传统的液相方式修饰相比，可以得到体外活性很高的单PEG化水蛭素。

主权项

1.一种利用阴离子交换柱辅助聚乙二醇修饰水蛭素的方法，其特征包括以下步骤：(A)将溶于磷酸盐缓冲液a中的水蛭素上样于经相同缓冲液平衡的离子柱中，直至全部样品吸附于离子交换介质上，没有洗脱物流出为止；(B)将溶于a液中的活化聚乙二醇溶液上样于步骤A的柱中，至全部溶液充满离子柱，停止上样；(C)待反应结束后，用a液冲洗步骤B的反应离子柱，至无洗脱物流出；用含有氯化钠或氯化钾的a液对步骤B柱子中物质进行洗脱，并收集洗脱组分。