条斑紫菜锰超氧化物歧化酶及其制备方法

摘要

本发明是一种条斑紫菜锰超氧化物歧化酶及其制备方法。该酶含有224个氨基酸残基，预测分子量为24469.09Da，在其N-端的24个氨基酸残基中疏水氨基酸占大部分，该肽段的作用为将该酶转运至线粒体；在该酶的氨基酸序列中第27、84、178位的组氨酸(H)，第174位的天冬氨酸(D)为与Mn²⁺的结合位点，在该序列中存在有保守的金属结合结构域“DVWEHAYYL”；该酶与五种藻类品种的Mn-SOD氨基酸序列比对，具有50-60％同源性。本发明利用该酶基因的cDNA序列及表达载体pSE380，构建表达重组质粒pSE380/MnSOD并转化至大肠杆菌DH5α中表达，表达产物以包涵体的形式存在；使得该酶的制备方法严谨合理，使得超氧化物歧化酶可以通过基因工程方法大批量生产，开拓了超氧化物歧化酶的原料来源。

主权项

1.一种含有条斑紫菜锰超氧化物歧化酶基因的cDNA的质粒载体，其特征在于：所述的质粒载体，是含有条斑紫菜锰超氧化物歧化酶基因cDNA序列的质粒载体pMD18-T；该含有条斑紫菜锰超氧化物歧化酶基因cDNA序列的质粒载体pMD18-T存在于大肠杆菌感受态细胞DH5α菌株中，其菌种保藏号CGMCC No.1414，菌种分类命名：大肠埃希氏菌(Escherichia coli)，菌种保藏日为2005年7月7日。