发明名称 |
通过小麦水溶性蛋白鉴定小麦品种的高效毛细管电泳方法 |
摘要 |
本发明涉及一种小麦品种的快速鉴定方法。该方法包括取样及样品制备、毛细管电泳和数据处理分析,通过建立小麦水溶性蛋白的标准高效毛细管电泳图谱,进而实现对小麦品种或种质进行鉴定,其特征是取单粒种子无胚端,约15-20mg,按1mg加10μl的比例加入20%乙醇,室温下震荡提取15分钟,10000rpm离心10分钟,上清液即为毛细管电泳样品;高效毛细管电泳时的电泳缓冲液为0.1M磷酸一甘氨酸缓冲液,该缓冲液pH为2.5,添加有20%乙腈和0.05%羟脯氨酰甲基纤维素,并给出了具体的电泳条件参数以及冲洗程序。相对于现有小麦品种的鉴定方法,该方法具有快速、准确、成本低、可重复性好的特点。 |
申请公布号 |
CN101201334A |
申请公布日期 |
2008.06.18 |
申请号 |
CN200610165294.9 |
申请日期 |
2006.12.15 |
申请人 |
首都师范大学 |
发明人 |
晏月明;王爱丽;高利艳;张倩;张艳贞 |
分类号 |
G01N27/447(2006.01);G01N33/68(2006.01) |
主分类号 |
G01N27/447(2006.01) |
代理机构 |
北京诺孚尔知识产权代理有限责任公司 |
代理人 |
庞涛 |
主权项 |
1.一种通过小麦水溶性蛋白鉴定小麦品种的高效毛细管电泳方法,包括取样及样品制备、毛细管电泳和数据处理分析,通过建立小麦水溶性蛋白的标准高效毛细管电泳图谱,进而实现对小麦品种或种质进行鉴定,其特征是取单粒种子无胚端,约15-20mg,按1mg加10μl的比例加入20%乙醇,室温下震荡提取15分钟,10000rpm离心10分钟,上清液即为毛细管电泳样品;高效毛细管电泳时的电泳缓冲液为0.1M磷酸-甘氨酸缓冲液,该缓冲液pH为2.5,添加有20%乙腈和0.05%羟脯氨酰甲基纤维素,具体电泳条件参数为:毛细管长度:31.5cm毛细管内径:50μm运行电压: 11.0kV毛细管温度:35℃样品槽温度:15℃进样:10kV,6-8秒。 |
地址 |
100037北京市海淀区西三环北路105号 |