发明名称 |
一种炭疽杆菌γ噬菌体裂解酶的表达方法 |
摘要 |
本发明公开了一种表达炭疽杆菌γ噬菌体裂解酶的方法。本发明采用毕赤酵母表达体系,利用已有知识产权的表达载体pMEX9K(ZL02117906.9),将炭疽杆菌噬菌体基因与pMEX9K连接,构建成新的表达质粒pMEXplyG,经线性化后电转化宿主菌巴斯德毕赤酵母Pichia pastoris GS115,经过随机挑选和加压筛选,获得生产菌株G6,使γ噬菌体裂解酶在毕赤酵母工程菌Pichia pastoris G6上清中获得表达,且表达产物不含多余氨基酸。经离心、超滤、离子交换层析、疏水层析、凝胶层析获得纯度高于95%的γ噬菌体裂解酶。该酶对炭疽杆菌及萌发时的芽孢有裂解活性,可用于炭疽洗消剂、炭疽治疗药物的开发。 |
申请公布号 |
CN101319195A |
申请公布日期 |
2008.12.10 |
申请号 |
CN200710105978.4 |
申请日期 |
2007.06.05 |
申请人 |
中国人民解放军军事医学科学院微生物流行病研究所;北京爱柯森伦生物工程科技有限公司 |
发明人 |
陈薇;曹晓梅;李曼;付玲;候利华;李建民;张晓鹏;董大勇;宋小红 |
分类号 |
C12N1/19(2006.01);C12N9/88(2006.01);C12R1/84(2006.01) |
主分类号 |
C12N1/19(2006.01) |
代理机构 |
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代理人 |
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主权项 |
1、一种表达炭疽杆菌γ噬菌体裂解酶的方法。其特征在于:以毕赤酵母作表达系统,将炭疽杆菌γ噬菌体裂解酶基因插入酵母表达载体,构建成新的表达质粒,经线性化后电转化宿主菌,经过随机挑选和加压筛选,获得生产菌株G6,使γ噬菌体裂解酶在毕赤酵母工程菌Pichia pastoris G6上清中获得表达,且表达产物不含多余氨基酸。 |
地址 |
100071北京市丰台区东大街20号 |