主权项 |
1、一种香草植物驱蚊草的离体组织培养方法,其特征在于该方法包括在MS培养基上进行叶片外植体培养,并在MS培养基上进行分化、继代和生根培养,获得驱蚊草的再生植株;所述驱蚊草离体组织培养技术是按以下步骤和方法进行:A:外植体的选择消毒:选用驱蚊草鲜嫩叶片作为外植体,用自来水冲洗干净,在无菌操作台上用75%酒精消毒30秒,再用1~5%的次氯酸钠消毒10~15分钟,最后用无菌水冲洗4~6次备用;B:外植体接种:将消毒后备用的外植体切成1平方厘米大小,接种在MS+6-BA 0.5mg/L+2,4-D 1.5mg/L+NAA 1.0mg/L愈伤组织诱导培养基上,接种瓶内每瓶平放3~5片,叶面向上,在培养室内暗培养,保持温度24±2℃,20天后,叶片伤口发生愈伤组织;C:驱蚊草组培苗的分化:当愈伤组织达到要求数量后,转接到MS+KT 1.0~2.0mg/L+NAA0.05mg/L的培养基上,25天后得到大量分化的组培苗;D:驱蚊草组培苗的继代:将长至2~3厘米高的苗转入生根培养基进行培养;愈伤组织继续接种在新配制的分化培养基上,15~20天转接一代,以保持高速度递增;E:生根培养:以1/2MS+NAA 0.5mg/L为培养基,对组培苗进行生根培养;F:驱蚊草再生植株生根培养后进行炼苗,炼苗以椰糠∶泥炭土∶珍珠岩=2∶1.5∶1.0为基质。 |