一种适用于饲料的转基因大豆检测试剂盒及检测方法

摘要

本发明涉及转基因作物，具体的说是一种适用于饲料的转基因大豆检测方法及检测试剂盒。具体试剂盒：PCR反应缓冲液22.5↘1，引物F2和R2各0.5↘1或F3和R3各0.5↘1，Taq DNA聚合酶0.5μl；阳性对照DNA：1↘1。引物为F2：5’－CATTTGGAGAGGACACGCTGACA－3’；R2：5’－CCGGAAAGGCCAGAGGATT－3’；F3：5’－TAACAACATGGCACAAGGGATACA－3’；R3：5’－CAGAGGATTTGCGGGCGGTTGC－3’。经过检测添加不同含量转基因豆粕的饲料进行检测，结果显示本发明能够成功检测出其中的转基因大豆外源基因。利用本发明对市售多种添加豆粕的畜禽和水产饲料进行检测，结果显示91％的配合饲料中含有转基因大豆成分，表明本发明为灵敏性高。

主权项

1.一种适用于饲料的转基因大豆检测试剂盒，其特征在于：1)第一次PCR反应液体系：PCR反应缓冲液22.5μl、引物F20.5μl、引物R20.5μl，Taq DNA聚合酶0.5μl；2)第二次PCR反应液体系：PCR反应缓冲液22.5μl、引物F30.5μl、引物R30.5μl、Taq DNA聚合酶0.5μl；其中，第一次PCR反应引物为：F2：5’-CATTTGGAGAGGACACGCTGACA-3’；R2：5’-CCGGAAAGGCCAGAGGATT-3’；第二次PCR反应引物为：F3：5’-TAACAACATGGCACAAGGGATACA-3’；R3：5’-CAGAGGATTTGCGGGCGGTTGC-3’；第一次PCR和第二次PCR反应液体系中PCR反应缓冲液含有：10mMTris-HCI，pH8.3；50mM KCI、1.5mM MgCI2、dNTP 0.2mM；3)阳性对照DNA 1μl。