细菌纤维素高产菌株培育筛选的方法

摘要

本发明涉及一种细菌纤维素高产菌株培育筛选的方法，实施步骤如下：(1)将木醋杆菌接种于种子培养基中，同时向培养基中加入过滤除菌的纤维素酶，每毫升培养基中纤维素酶的量在0.5U－8U，然后在27－30℃下培养，培养时间14－20h，获得的菌悬液的菌体浓度在10⁶－10⁸个/ml；(2)对获得的菌悬液进行诱变处理(3)将诱变后的木醋杆菌菌悬液的菌体浓度稀释到10³－10⁵个/ml，涂布于含有NaBr和NaBrO₃的琼脂培养基上，NaBr和NaBrO₃以重量比5∶1的比例加入到培养基中，使NaBr在固体培养基中的浓度达到1mmol/L－5mmol/L；在27－30℃下培养，从NaBr和NaBrO₃琼脂培养基上挑取存活的菌落进行纤维素的产量测定。本发明方法培育筛选得到的高产菌株，对细菌纤维素商业化应用具有重要意义。

主权项

1、一种细菌纤维素高产菌株培育筛选的方法，实施步骤如下：(1)加入纤维素酶制备木醋杆菌菌悬液将木醋杆菌接种于种子培养基中，同时向培养基中加入过滤除菌的纤维素酶，每毫升培养基中纤维素酶的量在0.5U-8U，然后在27-30℃下培养，培养时间14-20h，获得的菌悬液的菌体浓度在106-108个/ml；(2)对获得的菌悬液进行诱变处理将制得的菌悬液转入灭过菌的培养皿中，放在磁力搅拌器上，进行紫外诱变，诱变时间为1-5min；(3)通过NaBr和NaBrO3琼脂培养基质子自杀方法进行筛选将诱变后的木醋杆菌菌悬液的菌体浓度稀释到103-105个/ml，涂布于含有NaBr和NaBrO3的琼脂培养基上，NaBr和NaBrO3以重量比5∶1的比例加入到培养基中，使NaBr在固体培养基中的浓度达到1mmol/L-5mmol/L；在27-30℃下培养，从NaBr和NaBrO3琼脂培养基上挑取存活的菌落进行纤维素的产量测定。