EXPRESSION SYSTEM USED FOR THE ANTIBIOTIC-FREE PRODUCTION OF POLYPEPTIDES

摘要

Die Erfindung betrifft ein Expressionssystem zur Produktion eines oder mehrerer Zielpolypeptids/Zielpolypeptide, umfassend eine Wirtszelle, in deren Genom die DNA-Sequenz, die Glycerin-3-phosphatdehydrogenase codiert, inaktiviert oder teilweise oder vollständig deletiert ist und die mit einem extrachromosomalen Element, das eine DNA-Sequenz, die das bzw. die Zielpolypeptid(e) und Glycerin-3-phosphatdehydrogenase codiert, umfasst, transformiert worden ist, wobei sowohl das Wirtszellgenom als auch das extrachromosomale Element kein Antibiotikaresistenzgen tragen, sowie eine DNA-Sequenz, die für ein Polypeptid mit Glycerin-3-phosphatdehydrogenaseaktivität codiert, dadurch gekennzeichnet, dass die DNA-Sequenz ausgewählt ist aus a) DNA-Sequenzen, die eine Nucleotidsequenz gemäß SEQ ID NO:1 umfassen, b) DNA-Sequenzen, die eine Nucleotidsequenz, wiedergegeben durch die Nucleotide 1338 bis 2375 von SEQ ID NO:1 umfassen, c) DNA-Sequenzen, die von dem Plasmid pTP01 mit der Plasmidkarte gemäß Figur 4 und hinterlegt unter der Hinterlegungsnummer DSM 18890 codiert werden, d) DNA-Sequenzen, die für die Proteinsequenz gemäß SEQ ID NO:2 codieren, e) DNA-Sequenzen, die unter stringenten Bedingungen mit einer der DNA-Sequenzen gemäß a), b), c) oder d) hybridisieren, f) DNA-Sequenzen, die aufgrund der Degeneriertheit des genetischen Codes mit den DNA-/Nucleotidsequenzen gemäß a), b), c), d) oder e) verwandt sind, und g) komplementären Strängen zu den Sequenzen gemäß a) bis f), und das davon codierte Protein.