发明名称 重排噬菌体E基因、含有该基因的打孔质粒载体及其应用
摘要 本发明公开了一种经基因重排后获得的PhiX174噬菌体mE基因以及含有该基因的打孔质粒载体及其构建方法,本发明还进一步涉及该孔质粒载体在制备菌蜕中的用途,属于基因工程领域。本发明利用基因重排技术,对PhiX174噬菌体E基因进行重排,通过缺失第1位起始密码子ATG的A,使阅读框架为276个核苷酸的E突变成阅读框架为201个核苷酸的mE(从第76位ATG)。将所制备的mE基因与pBV220载体可操作性的相连接得到打孔载体pBV-mE,该打孔载体pBV-mE能够有效提高对细菌的打孔效率,裂解效率可高达99.9613%,比现有打孔质粒载体在同株大肠杆菌的裂解效率高出了3个数量级。
申请公布号 CN101302527A 申请公布日期 2008.11.12
申请号 CN200810111092.5 申请日期 2008.06.13
申请人 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 发明人 刘思国;常月红;刘慧芳;王春来;彭伟;司薇
分类号 C12N15/34(2006.01);C12N15/10(2006.01);C12N15/63(2006.01);C12N1/21(2006.01);C12R1/19(2006.01) 主分类号 C12N15/34(2006.01)
代理机构 北京科龙寰宇知识产权代理有限责任公司 代理人 孙皓晨;费碧华
主权项 1、重排噬菌体E(phage E)基因,其特征在于:其碱基序列为SEQ ID NO:1所示。
地址 150001黑龙江省哈尔滨市南岗区马端街427号