发明名称 |
重组人中期因子(rh-Midkine)的表达及其单克隆抗体的制备和应用 |
摘要 |
本发明属于生物医药领域,公开了一种重组人中期因子(rh-Midkine)的表达及其单克隆抗体的制备和应用。特征是通过大肠杆菌进行人中期因子(Midkine,MK)的原核表达,得到的重组蛋白30P-MK具有促进细胞增殖的生物活性,为MK在肿瘤、细胞生物学和神经系统等方面的研究提供基础;30P-MK蛋白纯化后免疫Balb/c小鼠,取脾细胞与SP2/0细胞融合、筛选得到抗人MK单克隆抗体杂交瘤,所分泌的单抗为IgG1,通过对人肿瘤组织样品中中期因子Western-blotting和免疫组化的检测实验验证表明得到的单抗特异性强,背景低,可发展成为诊断试剂盒用于临床和实验室检测肿瘤组织和血清中MK的表达水平,为通过MK单抗靶向治疗肿瘤奠定了基础。 |
申请公布号 |
CN101294164A |
申请公布日期 |
2008.10.29 |
申请号 |
CN200710021657.6 |
申请日期 |
2007.04.23 |
申请人 |
南京大学 |
发明人 |
侯亚义;赵树立;王庆苓;黄亚红;王会;谢浩 |
分类号 |
C12N15/63(2006.01);C12N15/12(2006.01);C12N1/21(2006.01);C12P21/02(2006.01);C07K19/00(2006.01);C07K16/18(2006.01);C12N5/18(2006.01);A61K39/395(2006.01);G01N33/577(2006.01);G01N33/574(2006.01);G01N33/49(2006.01);G01N33/493(2006.01);A61P35/00(2006.01) |
主分类号 |
C12N15/63(2006.01) |
代理机构 |
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代理人 |
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主权项 |
1、一种重组质粒载体,其特征是该载体为pET 30a/midkine,它含有适合于在原核细胞宿主中可溶性表达的人中期因子(midkine,MK),具有如下所示的核苷酸序列:CATATGGGCCATCGCCGGCTGGGCAGCGAGGAGCAGCAGACCAGCAGCAGCGGTCGGCAGCAGGTATTTCCATGGAAAAAGAAAGATAAGGTGAAGAAGGGCGGCCCGGGGAGCGAGTGCGCTGAGTGGGCCTGGGGGCCCTGCACCCCCAGCAGCAAGGATTGCGGCGTGGGTTTCCGCGAGGGCACCTGCGGGGCCCAGACCCAGCGCATCCGGTGCAGGGTGCCCTGCAACTGGAAGAAGGAGTTTGGAGCCGACTGCAAGTACAAGTTTGAGAACTGGGGTGCGTGTGATGGGGGCACAGGCACCAAAGTCCGCCAAGGCACCCTGAAGAAGGCGCGCTACAATGCTCAGTGCCAGGAGACCATCCGCGTCACCAAGCCCTGCACCCCCAAGACCAAAGCAAAGGCCAAAGCCAAGAAAGGGAAGGGAAAGGACCTCGAG |
地址 |
210093江苏省南京市鼓楼区汉口路22号 |