山茱萸核糖体DNA的ITS片段及其制备方法

摘要

本发明涉及山茱萸核糖体DNA的ITS片段及其制备方法，可有效解决山茱萸的品种鉴定、品种改良、育种，以及种质资源的开发利用问题，ITS片段由三部分组成，即ITS1，5.8S，ITS2，制备方法是：取山茱萸植物叶片研碎，加入PVP粉末研成细粉，将细粉置于提取缓冲液中，离心，弃去上清夜，加入用Vc+2×CTAB制成的抽提液以及β－巯基乙醇，混匀，加入由等体积的饱和酚－氯仿－异戊醇制成的溶液处理2次，除去杂质，离心，取上清液，加入异丙醇，收集沉淀物，抽干乙醇，得DNA物质，再利用设计的引物对DNA物质进行PCR扩增、纯化，对纯化后的PCR产物测序得ITS片段，方法简单、科学，经济和社会效益巨大。

主权项

1、一种山茱萸核糖体DNA的ITS片段，其特征在于，该ITS片段是由ITS1、5.8S、ITS2山苵萸核糖体DNA的三部分组成，其中，ITS1为253bp，5.8S为156bp，ITS2为273bp，总共682bp，具体是：1 tcgaaacctg cacagcagaa cgacccgcga acgtgttttt tacgacggcg gcggggcgct、61 ctcgcgggtg ccccggcgcc atcagggtga gcgcgtgccg atcccttcgc ggggggaggc、121 gggcgctttc ccctgcaaaa ataacgaacc ccggcgcgaa ccgcgccaag gaacacgaac、181 gaaagagcga gcccgcgaag ccccgtccgc gggcgcgatc gcgggccggc atcttccttt、241 atcgaaatcg aacgactctc gacaacggat atctcggctc tcgcatcgat gaagaacgta、301 gtgaaatgcg atacttggtg tgaattgcag aatcccgtga accatcgagt ctttgaacgc、361 aagttgcgcc cgaagccgtc aggccgaggg cacgtctgcc tgggcgtctc acatcgcgtc、421 gcccccctca ccaccccacc acacacttcg gtgacggtgg gcggggggcg gacagtggcc、481 ccccgtgcgc tcgctcacag cacagtgtgc ggtcggccga aaaaacgagt cgccggcgac、541 ggacgtcacg acaagtggtg gttgagacgg aaccttaagc gtcctgtcgt gcgtgccgca、6o1 gtcgccagcg cgatgctcgc gcgaccctta acgcgccgtc accgacggtg cctcgaccgc、661 gaccccaggt caggcgggac ta。