一种微生物多糖威兰胶的生产方法

摘要

一种微生物多糖威兰胶的生产方法，属于生物工程技术领域。本发明以一株粪产碱杆菌为发酵菌种，使用食品工业中常用的蔗糖或葡萄糖作为微生物培养的碳源，以农业生产中常用的化肥作为氮源和无机盐，辅以酵母粉配制微生物生长的培养基，在30℃以1.0vvm、500r/min通风搅拌条件下好氧发酵，发酵过程中流加特殊配制的补料液以达到以下目的：(1)控制发酵液的渗透压处于低渗条件；(2)控制发酵液的pH处于4.0～7.0之间；(3)为微生物生长提供丰富的碳源和氮源等营养物质，经72小时得到威兰胶发酵液，在95℃～115℃下常压干燥得到威兰胶产品。威兰胶产品生产过程不使用有机溶剂，发酵液只经一步干燥即得到符合石油开采工业规格的威兰胶产品。

主权项

1.一种微生物多糖威兰胶的生产方法，其特征是通过好氧培养一株产威兰胶的菌株产碱杆菌ATCC 31555，在通风发酵过程中流加特殊配制的补料培养基，使得(1)控制发酵液的渗透压处于低渗条件；(2)控制发酵液的pH处于4.0～7.0之间，并保持恒定；(3)为微生物生长提供丰富的碳源和氮源营养物质，经72小时得到威兰胶发酵液：菌株：产碱杆菌ATCC 31555；所用的种子培养基组分包括葡萄糖，硝酸铵，酵母粉，蛋白胨，KH2PO4，MgSO4，种子培养基的pH为4～7，使用前经121℃灭菌20min；所用的发酵培养基组分包括葡萄糖、蔗糖、酵母粉、尿素、磷酸氢二钾、硫酸镁，发酵培养基的初始pH为4～7，使用前经121℃灭菌20min；所用的补料培养基组分包括葡萄糖、酵母粉、尿素和/或硝酸铵、氨水；种子制备：从固体斜面挑取一环新鲜培养的微生物菌种，接入种子培养基中，30℃培养过夜，得种子液；威兰胶发酵：将培养好的种子液按5％(v/v)的接种量接入发酵培养基中，在30℃，保持罐压0.01MPa，以1.0vvm、500r/min通风搅拌条件下好氧发酵，发酵过程中流加补料培养基，利用补料培养基控制发酵液的pH值，发酵过程中pH控制在4～7范围内；经72小时得威兰胶发酵液；所得的威兰胶发酵液在105℃条件下常压干燥，再经粉碎和筛分得到粉末状的威兰胶产品；菌体生长阶段的补料控制方法：微生物多糖发酵过程中，微生物生长对碳源和氮源的需求呈一定的比例关系，在利用生理性酸性的碳源时，发酵液的pH将会呈上长趋势，利用电脑控制的蠕动泵自动流加生理性碱性的氮源：尿素和/或硝酸盐，或本身就呈碱性的氮源氨水，控制发酵液的pH在4～7的范围，有利于微生物的生长；产威兰胶阶段的补料控制方法：产碱杆菌ATCC 31555在合成威兰胶的过程中pH基本维持不变或呈略微上升趋势，根据菌体浓度及菌体消耗碳源的能力，按一定速率缓慢补入碳源，使发酵液中的残糖维持在1～5g/L范围内。