快速检测尿液中大肠杆菌的方法

摘要

本发明涉及一种快速检测尿液中大肠杆菌的方法：用无菌尿杯收集尿液，然后从中取尿液1.0～2.0ml于EP管，2000～3500rpm离心2～4min，取上清400～800μl转至另一EP管，10000～15000rpm离心至少5min，弃上清，吸取100～200μl尿沉渣涂片2张，固定后，一张玻片上加入浓度为2～10ng/μl的探针30～50μl，另一张玻片上加入浓度为1ng/μl的探针，然后在45℃～55℃条件下避光杂交30～45min，清洗后，置于洗涤液中浸泡10～20min，清洗，干燥后，置荧光显微镜下观察结果。本发明所采用的方法十分敏感，最低检出限达到了10³～10⁴CFU/ml。本发明所采用的方法特异性强，特异性进达到100％。其理论基础主要是基于成熟的细菌遗传学原理。本发明一份临床标本的检测时间约为1h，耗时较传统培养鉴定方法大为缩短。

主权项

1.快速检测尿液中大肠杆菌的方法，其特征在于：用无菌尿杯收集尿液，然后从中取尿液1.0～2.0ml于EP管，2000～3500rpm离心2～4min，取上清400～800μl转至另一EP管，10000～15000rpm离心至少5min，弃上清，吸取100～200μl尿沉渣涂片2张，固定后，一张玻片上加入浓度为2～10ng/μl的探针30～50μl，另一张玻片上加入浓度为1ng/μl的探针，然后在45℃～55℃条件下避光杂交30～45min，清洗后，置于洗涤液中浸泡10～20min，清洗，干燥后，置荧光显微镜下观察结果。