一种表达糖调节蛋白的方法及其应用

摘要

本发明属于生物医学领域，涉及一种表达糖调节蛋白的方法及其应用。本发明通过将糖调节蛋白基因经改造成为可分泌型蛋白，装载于体外培养的肿瘤细胞，在肿瘤细胞中表达糖调节蛋白，刺激机体的抗肿瘤免疫功能，可制备肿瘤疫苗，对肿瘤进行免疫治疗。同时，在肿瘤中直接注射表达糖调节蛋白基因的腺病毒，感染肿瘤细胞，表达糖调节蛋白，并与化疗及放射治疗相结合，达到治疗肿瘤的目的。

主权项

1. 一种表达糖调节蛋白的方法，其特征是将糖调节蛋白基因改造成可分泌型糖调节蛋白，采用腺病毒载体感染体外培养的肿瘤细胞后，在所述的肿瘤细胞中表达所述糖调节蛋白；所述的糖调节蛋白选自序列1的人糖调节蛋白基因和/或序列2的小鼠糖调节蛋白基因；所述的可分泌型糖调节蛋白是通过分离并克隆上述糖调节蛋白基因，引物设计时去掉C端编码KDEL氨基酸序列AAA GAT GAA TTA，得分泌型糖调节蛋白，扩增人的糖调节蛋白基因所用引物序列为：上游引物 5′ACGCGTCGACATCGAAGGGGACTTGAGACTC 3′下游引物 5′ATAGTTTAGCGGCCGCTTATTCAGCTGTAGATTCCTTTGC 3′扩增小鼠的糖调节蛋白基因所用引物序列为：上游引物 5′GCGTCGACACGCACCATGAGGGTCCTGTG 3′下游引物 5′ATAGTTTAGCGGCCGCTTACTCTGTAGATTCCTTTTCTG 3′。