AMPLIFICACION DE CADENAS POR DESPLAZAMIENTO QUE UTILIZA ENCIMAS TERMOFILICAS.

摘要

METODOS DE AMPLIFICACION DE DESPLAZAMIENTO DE HILOS (SDA TERMOFILICO), QUE PUEDEN SER LLEVADAS A CABO SOBRE UN AMBITO AMPLIO DE TEMPERATURAS (37-70 GRADOS C). EL INTERVALO DE TEMPERATURA PREFERIDO PARA LA SDA TERMOFILICA ES DE 50 A 70 GRADOS C. SE HA COMPROBADO QUE CIERTAS ENDONUCLEASIS DE RESTRICCION TERMOFILICA SON CAPACES DE BISELAR EL LUGAR DE RECONOCIMIENTO/DISOCIACION DE LA ENDONUCLEASIS DE RESTRICCION HEMIMODIFICADA, COMO ES REQUERIDO POR SDA Y DESASOCIACION DEL LUGAR. SE HA COMPORBADO ADEMAS QUE CIERTAS POLIMERASIS TERMOFILICAS SON CAPACES DE EXTENDERSE DESDE EL BISEL MIENTRAS DESPLAZAN LA CORRIENTE DESCENDENTE DEL HILO. EL SDA TERMOFILICO, POR LA REACCION DE TEMPERATURAS MAS ELEVADAS QUE LAS PREVIAMENTE POSIBLES CON UN SISTEMA DE ENZIMA SDA CONVENCIONAL, TIENE UNA EFICIENCIA Y ESPECIFICIDAD MEJORADAS, UNA AMPLIFICACION DE FONDO NO ESPECIFICA REDUCIDA, Y PRODUCCIONES POTENCIALMENTE MEJORADAS DE PRODUCTOS DE APLIFICACION. ADEMAS, LA NECESIDAD DE AÑADIR ALS ENZIMAS EN UN PASO SEPARADODESPUES DE LA DESNATURIZACION DE CALOR INICIAL DE OBJETIVOS DE DOBLE HILO, SE ELIMINA CUANDO SE UTILIZAN ENZIMAS CAPACES DE TOLERAR LA TEMPERATURA ED DESNATURIZACION.