基于磁珠和纳米金探针的微量蛋白质的测定方法

摘要

本发明涉及一种基于磁珠及纳米金探针的高灵敏度微量蛋白质的测定方法，其特征在于：首先用待测蛋白的单克隆抗体标记磁珠，在纳米金上标记待测蛋白的多克隆抗体，在纳米金上同时还标记一种带有生物素标记的DNA探针，纳米金上的DNA探针通过生物素－链亲和素反应，又标记上了辣根过氧化酶(HRP)，组成纳米金探针，将标记好抗体的磁珠及纳米金探针与待测蛋白样品混合，37℃孵育一段时间，然后再洗去没有反应的纳米金探针，用TMB显色系统进行显色，从而达到对待测蛋白进行定量检测的目的。本发明检测时间可缩至1－1.5小时，灵敏度达pg/ml。

主权项

1、基于磁珠和纳米金探针的微量蛋白质的测定方法，其特征在于首先用待测蛋白质的单克隆抗体标记磁珠，在纳米金上标记上待测蛋白质的多克隆抗体，在纳米金上同时标记一种带有生物素标记的DNA探针，纳米金上的DNA探针通过生物素-链亲和素反应，又标记上了辣根过氧化酶，组成纳米金探针；将标记好待测蛋白质单克隆抗体的磁珠及纳米金探针与待测蛋白质样品混合，37℃温度下孵育，然后再洗去没有反应的纳米金探针，用四甲基联苯胺显色系统进行显色，从而达到对待测蛋白质进行定量测定的目的。