抗猪蓝耳病免疫球蛋白的制备方法

摘要

本发明涉及一种抗猪蓝耳病免疫球蛋白的制备方法，步骤如下：(1)用组织培养的灭活猪蓝耳病病毒与弗氏完全佐剂以1∶1的比例混合后作为免疫原免疫牛、驴，每头受体动物首次颈部多点肌肉注射30－50头份的猪蓝耳疫苗；(2)免疫后10－15天，进行加强免疫；猪蓝耳病疫苗为100－200头份；(3)采用自然加压凝血法分离免疫球蛋白，用硫酸铵沉淀杂蛋白，胃蛋白酶剪切Fc段，保留抗体F(ab)2段，再用硫酸铵沉淀Fc蛋白，除去Fc蛋白，加入盐酸调至pH2.0，4.0℃，放置2天，灭活病毒，再加NaOH调至pH7.0，杀灭其它不同动物易感病毒；(4)血液中加入抗生素，放置5－10小时，分离血清，用辛酸法和硫酸铵法分离提取免疫球蛋白；(5)过滤除菌，无菌分装。本发明制备简单，应用简便。

主权项

1、一种抗猪蓝耳病免疫球蛋白的制备方法，其特征在于具体实施步骤如下：(1)用组织培养的灭活猪蓝耳病病毒与弗氏完全佐剂以1∶1的比例混合后作为免疫原免疫牛、驴，每头受体动物首次颈部多点肌肉注射30-50头份的猪蓝耳疫苗，进行基础免疫；(2)在基础免疫后10-15天进行加强免疫；猪蓝耳病疫苗为100-200头份；(3)强化免疫后，猪蓝耳抗体效价达到高峰值时准备屠宰采血；采用自然加压凝血法分离免疫球蛋白，用硫酸铵沉淀杂蛋白，胃蛋白酶剪切Fc段，保留抗体F(ab)2段，再用硫酸铵沉淀Fc蛋白，除去Fc蛋白，加入盐酸调至pH2.0，4.0℃，放置1-4天，灭活病毒，再加NaOH调至pH 7.0，杀灭其它不同动物易感病毒；(4)血液中加入100-300单位/ml青霉素和100-300微克/ml链霉素等抗生素，自然凝固、放置5-10小时，分离血清，用辛酸法和硫酸铵法分离提取免疫球蛋白；(5)过滤除菌，无菌分装，冰箱内保存。