从造礁石珊瑚中提取虫黄藻基因组DNA的试剂盒及其方法

摘要

本发明提供一种从造礁石珊瑚中提取虫黄藻基因组DNA的试剂盒及其方法。试剂盒包括：试剂A(裂解液)、试剂B(蛋白酶E)、试剂C(RNAase A)、试剂D(过饱和NaCl溶液)、试剂E(DNA洗涤液)、试剂F(DNA洗脱液)。在本发明的方法中，首先用含SDS的裂解液裂解组织细胞，然后提供一个高盐低PH的环境，使溶液中蛋白质进一步变性，而DNA可以结合在硅胶柱上。最后在水溶性缓冲液中，DNA就能从层析柱上定量回收。采用本试剂盒及其提取方法，可以快速便捷从不同种类的造礁石珊瑚中提取虫黄藻的基因组DNA，所获得的DNA可以用于分子生态学、系统进化等研究，进而满足珊瑚礁自然保护区定期监测任务的需要。

主权项

1.从造礁石珊瑚中提取虫黄藻基因组DNA的试剂盒，包含有以下试剂：(a)试剂A：由pH8.0，100-300mM的Tris-Boric溶液、10-100mM的EDTA溶液、质量浓度1-5％的SDS溶液、50-200mM的NaCl溶液和蒸馏水按25∶10∶10∶2∶53的体积比混合而成；(b)试剂B：为蛋白酶E，其浓度为5-15mg/ml；(c)试剂C：为RNAase A，其浓度为5-30mg/ml；(d)试剂D：为过饱和NaCl溶液，含有5-7M的NaCl；(e)试剂E：为DNA洗涤液，为体积浓度为60-80％的乙醇溶液；(f)试剂F：为DNA洗脱液，采用pH8.0，5-20mM的TE缓冲液。