一种β－羟基丁酸与β－羟基戊酸的共聚酯降解菌株及其选育方法

摘要

本发明属于生物材料，具体涉及一种可降解PHBV(β－羟基丁酸与β－羟基戊酸的共聚酯)的菌株以及该菌株的选育方法本发明对可降解PHB的青霉菌株进行紫外诱变处理，即接种到固体斜面培养基上培养、冲洗、振荡、磁力搅拌下用紫外灯照射、涂布于固体平板培养基上，避光培养，选取单菌落，点植法培养，观察并定期测量菌落周围水解透明圈的大小，初步筛选、单菌落接入固体斜面培养基、摇瓶培养。筛选到的青霉(Penicillium.sp)DS9702－D10－06具有很强的PHBV降解能力。其PHBV解聚酶的酶活力可达7~8U/ml。

主权项

1、一种β-羟基丁酸与β-羟基戊酸的共聚酯降解菌株的选育方法，其特征是：将具有降解PHB能力的青霉菌株接种到固体斜面培养基上，该固体斜面培养基组分为PHBV 0.15％，MgSO4·7H2O 0.05％，NH4Cl2 0.1％，CaCl2·2H2O 0.0005％，KH2PO4 0.554％，Na2HPO4·12H2O 1.194％，琼脂2％，pH 6.8，培养数日至出现大量分生孢子；以无菌水冲洗，将分生孢子冲洗入装有玻璃珠的三角瓶中，振荡，使分生孢子分散，显微镜检查，使孢子浓度为106~107个/ml；分生孢子悬液装在灭菌平皿中，在磁力搅拌下用紫外灯照射，处理后的悬液在无菌室红灯照射下适当稀释；取上述悬液涂布于固体平板培养基上，避光培养数日，选取单菌落，点植法培养，观察并定期测量菌落周围水解透明圈的大小，初步筛选水解透明圈较大的菌株；根据初筛结果，从固体平板培养基平皿中挑取需要的单菌落接入上述固体斜面培养基，待长满后接入液体培养基中，该液体培养基组分为PHBV 0.15％，MgSO4·7H2O 0.05％，NH4Cl2 0.1％，CaCl2·2H2O 0.0005％，KH2PO4 0.554％，Na2HPO4·12H2O 1.194％，pH 6.8，摇瓶培养。