大菱鲆红体病虹彩病毒环介导等温扩增检测方法

摘要

本发明公开一种大菱鲆红体病虹彩病毒环介导等温扩增(LAMP)检测方法。该方法包括两对用于检测大菱鲆红体病虹彩病毒的环介导等温扩增引物FIP、BIP、F3与B3，和一种利用上述两对引物检测大菱鲆红体病病毒虹彩病毒的LAMP方法，其中包括反应模板的制备、LAMP反应体系、LAMP反应程序和检测结果判断。本发明具有简便、快速、高特异性和灵敏性的特点，仅需一个水浴锅或金属浴即可在2小时内准确检测出鱼苗、成鱼及饲料中的大菱鲆红体病虹彩病毒，非常适用于大菱鲆红体病虹彩病毒的流行情况调查。

主权项

1.一种大菱鲆红体病虹彩病毒环介导等温扩增检测方法，其特征在于它的方法包括以下两部分：1).提供两对用于检测大菱鲆红体病虹彩病毒的LAMP引物序列，即长度分别为45bp、46bp、18bp和18bp的寡聚核苷酸序列，依次命名为FIP、BIP、F3和B3；上述两对LAMP引物的寡聚核苷酸序列如下：FIP：5’-TGCGGTGGGTGACGTTCTTTACTTTTCTTGGTGCATCTGGACCTC-3’BIP：5’-ACGTGCAAAGCAATTACACCGCTTTTGCAAAGGCAGATTGACCTTG-3’F3：5’-GTCACACCCGCAGACAAT-3’B3：5’-ACCTCGGACAGGGGATTG-3’2).提供一种大菱鲆红体病虹彩病毒的LAMP检测方法，即首先从待检测样品中制备反应模板，并配制LAMP反应体系，然后通过LAMP反应程序对反应模板进行扩增，最后根据反应混合物的颜色显示对检测结果进行判断。