主权项 |
1、一种免疫磁性微球的制备方法,其特征在于免疫磁性微球的制备方法主要是由下述步骤实现的:一、化学共沉淀法制备磁流体:a、在氮气保护下,按Fe2+∶Fe3+∶OH-的摩尔比为1∶2∶8~9的配比将氯化亚铁和氯化铁的混合溶液加入到重量百分比浓度为20~25%的碱溶液中;再用盐酸调节至pH=6~7;b、向步骤一a步得到的反应液中滴加占步骤一a步反应液总重量3~5%的表面活性剂,迅速升温至80℃~90℃,以300~600r/min速度保温搅拌1~2小时,冷却至室温,用磁铁分离将固体分离出来后用质量百分比浓度为95%的乙醇溶液反复洗涤三至五次,即得到磁流体;二、微乳液聚合法制备亲水性的磁性微球:按重量份数比将6~40份步骤一制得的磁流体、60~90份高分子聚合单体、3~6份交联剂和1~10份引发剂超声分散至混合均匀,得到油相磁性胶体;然后在氮气保护下,将油相磁性胶体加入水相,水相按重量份数比由0.5~1份乳化剂、0.4~0.8份助乳化剂和98.2~99.1份分散介质的混合液;再在70℃~90℃温度下,以300~600r/min速度搅拌8~14小时,冷却至室温,用磁铁分离将固体分离出来后用95%的乙醇溶液洗涤三至五次,再用蒸馏水洗涤三至五次,分散在水中超声10min后保存,即得到亲水性的磁性微球;三、I、对反应器进行封闭:先用质量百分比浓度为1%的牛血清白蛋白溶液充满反应器,在4℃条件下存放10~15h,倒掉牛血清白蛋白溶液后再用缓冲溶液洗涤三至五次;II、将磁性微球放入反应器,再按磁性微球与抗体质量比为100~400∶1配比加入抗体,在30~37℃条件下温育2~6h或者在4℃条件下温育12~24h;用磁分离架分离,然后用缓冲溶液洗涤分离出的固体三至五次,每次洗涤5分钟;III、将洗涤后的固体用质量百分比浓度为1%的血清白蛋白溶液对磁球表面进行封闭,尔后在30~37℃条件下温育1~6h,得到免疫磁性微球。 |