促进灵芝酸和灵芝多糖生物合成的发酵方法

摘要

本发明公开了一种促进灵芝酸或灵芝多糖生物合成的发酵方法。本发明对灵芝细胞生长阶段和产物合成阶段所需要的条件进行了考察，依据灵芝细胞生长和产物合成阶段所需环境条件的不一致性，分别考察了pH两阶段、溶氧两阶段的控制策略对灵芝酸和灵芝多糖生物合成的影响，在此基础上，结合中间补料策略，又分别考察了pH两阶段、溶氧两阶段控制策略或补料策略相互协同在一起后对灵芝酸和灵芝多糖生物合成的影响。试验结果说明，无论是分别采用pH值两阶段控制策略、溶氧浓度两阶段控制策略或是将pH两阶段控制策略、溶氧浓度两阶段控制策略与补料策略协同在一起，均显著促进灵芝细胞生长，大幅度提高灵芝酸或灵芝多糖的含量或产量。

主权项

1、一种促进灵芝酸或灵芝多糖生物合成的发酵方法，包括灵芝细胞斜面菌种培养、一级液体种子培养、二级液体种子培养和液体深层发酵，其特征在于：在液体深层发酵时选用以下六种方法中的任何一种进行细胞培养：(1)pH两阶段：将液体发酵液的pH值分成两个阶段来进行调控，使两个阶段的pH值恒定且互不相同；(2)溶氧浓度两阶段：将发酵液的溶氧浓度分成两个阶段来进行调控，其中，在液体发酵的第一阶段将发酵体系的溶氧浓度控制为25％，在液体发酵的第二阶段将发酵体系的溶氧浓度控制为10％；(3)pH两阶段与补料相协同：将液体发酵液的pH值分成两个阶段来进行调控，使两个阶段的pH值恒定且互不相同；当培养液残糖浓度在5-10g/L时，每升培养液补加15g乳糖，继续培养；(4)溶氧浓度两阶段与补料相协同：将发酵液的溶氧浓度分成两个阶段来进行调控，其中，在液体发酵的第一阶段将发酵体系的溶氧浓度控制为25％，在液体发酵的第二阶段将发酵体系的溶氧浓度控制为10％；当培养液残糖浓度在5-10g/L时，每升培养液补加15g乳糖，继续培养；(5)pH两阶段与溶氧浓度两阶段相协同：将液体发酵液的pH值分成两个阶段来进行调控，使两个阶段的pH值恒定且互不相同；将发酵液的溶氧浓度分成两个阶段来进行调控，其中，在液体发酵的第一阶段将发酵体系的溶氧浓度控制为25％，在液体发酵的第二阶段将发酵体系的溶氧浓度控制为10％；(6)pH两阶段、溶氧浓度两阶段和补料相协同在一起：将液体发酵液的pH值分成两个阶段来进行调控，使两个阶段的pH值恒定且互不相同；将发酵液的溶氧浓度分成两个阶段来进行调控，其中，在液体发酵的第一阶段将发酵体系的溶氧浓度控制为25％，在液体发酵的第二阶段将发酵体系的溶氧浓度控制为10％；当培养液残糖浓度在5-10g/L时，每升培养液补加15g乳糖，继续培养。