球虫重组卡介苗及制备方法

摘要

本发明提供一种球虫重组卡介苗，包括穿梭表达载体球虫重组卡介苗和整合表达载体球虫重组卡介苗疫苗。卡介苗活载体疫苗本身具有较强的细胞免疫和体液免疫佐剂作用，能高效表达球虫蛋白，使表达的蛋白发挥很好的免疫保护作用，两者优势组合，达到更好的预防鸡球虫病的目的。疫苗具有非常好的抗球虫效果，热稳定性好，运输和保存较为容易；免疫力持久，单次接种可持续诱导长期对“靶抗原”的免疫反应，可减少接种次数，简化免疫程序，增强对球虫病的免疫效果；基因操作和生产过程较为简单，安全性高，球虫抗原可在BCG细胞壁上持续稳定表达；产品不需纯化，可直接用于免疫保护试验，免去了蛋白质后处理的复杂工序，大大降低了成本，便于推广。

主权项

1、一种球虫重组卡介苗，其特征在于：首先获得球虫保护性抗原基因，进行TA克隆，测序鉴定正确后酶切回收目的片段，再分别与同样进行酶切反应的大肠杆菌-分枝杆菌穿梭表达载体PMV261或整合表达载体PMV361相连，重组质粒转化到BCG，经抗性和PCR筛选得到阳性球虫重组卡介苗。