发明名称 一种鉴定大豆种子真实性和/或品种纯度的方法
摘要 本发明公开了一种鉴定大豆种子真实性和/或品种纯度的方法。该方法包括以下步骤:将待检测种子进行单粒机械粉碎,加入CTAB缓冲液,65℃水浴20-40分钟,再加入DNA提取液,提取得到每粒待检测种子的基因组DNA;2)以步骤1)提取的基因组DNA为模板,用SSR引物进行PCR扩增,将所得到的PCR扩增产物进行6-9%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,得到每粒待检测种子的电泳图谱;3)将每粒待检测种子的电泳图谱与按照所述步骤1)和2)的方法得到的标准种子的电泳图谱进行比较,得出待检测种子的真实性和/或品种纯度。该方法保留SSR标记的特色和关键技术,简化了实验步骤,降低了技术含量,能够在短时间内对大量样品进行快速鉴定,方法相对简单,鉴定费用较低,结果准确。
申请公布号 CN100406577C 申请公布日期 2008.07.30
申请号 CN200610088869.1 申请日期 2006.07.21
申请人 北京农学院 发明人 谢皓;陈学珍;于同泉;秦岭;路苹;杨柳;王建立;冯永庆;南张杰
分类号 C12Q1/68(2006.01);G01N27/26(2006.01) 主分类号 C12Q1/68(2006.01)
代理机构 北京纪凯知识产权代理有限公司 代理人 关畅;任凤华
主权项 1.一种鉴定晋大75大豆种子真实性和/或品种纯度的方法,包括以下步骤:1)按照如下方法提取每粒待检测种子的基因组DNA:将待检测种子进行单粒机械粉碎,加入CTAB缓冲液,65℃水浴20-40分钟,再加入DNA提取液,提取得到每粒待检测种子的基因组DNA;2)按照如下方法对每粒待检测种子分别进行PCR扩增:以步骤1)提取的基因组DNA为模板,用SSR引物进行PCR扩增,将所得到的PCR扩增产物进行6-9%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,得到每粒待检测种子的电泳图谱;所述SSR引物为由序列表中序列1和序列2的核苷酸序列组成的一对寡核苷酸序列;3)将每粒待检测种子的电泳图谱与按照所述步骤1)和2)的方法得到的标准种子的电泳图谱进行比较,如待检测种子与标准种子的谱带组成一致,则该待检测种子与标准种子为同一品种,得出待检测种子的真实性和/或品种纯度。
地址 102206北京市昌平区回龙观镇北农路7号