治疗仔猪断奶多系统衰竭综合症的自家高免血清制备方法

摘要

本发明涉及一种治疗仔猪断奶多系统衰竭综合症的自家高免血清制备方法，在经免疫学方法确诊仔猪断奶多系统衰竭综合症PMWS疫情的情况下，采用多重PCR技术检测脏器中主要病原体PCV2和协同感染病原PPV以及PRRSV病毒含量，选择病毒含量相对高的脏器作原料制备自家脏器苗，再按照一定的免疫程序，用灭活脏器苗对自家漏去势公猪进行多点注射强化免疫，用琼扩试验检测免疫猪的血清抗体水平，取用抗体水平高者的血液分离血清，经生物学安全检验后即可作为治疗用的高免血清。本发明以自家脏器苗免疫自家公猪制备的高免血清，可以在不扩散病原的前提下，对本场发生的PMWS猪进行治疗，以最大程度地降低发病率和死亡率，减少经济损失。

主权项

1.一种治疗仔猪断奶多系统衰竭综合症的自家高免血清制备方法，其特征在于包括如下步骤：1)自家脏器灭活苗的制备：选取经PCV2抗体检测为阳性且出现典型仔猪断奶多系统衰竭综合症病变而剖杀的病猪脏器，对被检病猪脏器提取DNA后，利用多重PCR方法进行PCV2、PPV、PRRSV三种病毒检测，选取病毒相对含量较高者作为制备脏器苗的原料；其中，设计检测病毒基因的引物分别是：PCV2引物5’-primer：5’-GCGGATCCATGCCAAATAACAAC-3’，3’-primer：5’-ATCTCGAGTCATGCTGAGGGTGA-3’；PPV引物5’-primer：5’-CAGGATCCGCAACCTCACCACC-3’，3’-primer：5’-GCCTCGAGTGCATGTTAGATTTCCC-3’；PRRSV引物：5’-primer：5’-GCGGATCCATGCCAAATAACAAC-3’，3’-primer：5’-ATCTCGAGTCATGCTGAGGGTGA-3’；用组织匀浆器对选取的脏器苗原料进行匀浆，然后用灭菌纱布过滤，过滤液中加1％甲醛用以灭活，再加与过滤液等量的油类佐剂搅拌乳化，制得自家脏器灭活苗，4℃保存备用；2)高免血清的制备：利用上述制得的自家脏器灭活苗，对本场3月龄大小的漏去势健康公猪进行多点注射强化免疫，2～3次免疫后，用琼扩检测免疫猪血清中抗PCV2的抗体，将经琼扩检测抗体效价在1∶32以上的免疫猪剖杀放血，分离血清，加入青霉素、链霉素各2000μg/1000ml，经无菌检测及生物学安全检测后，得到高免血清按每10ml/每支分装入容器中，4℃保存。