发明名称 |
一种微生物转化法生产d-伪麻黄碱的方法 |
摘要 |
一种微生物转化法生产d-伪麻黄碱的方法,属于发酵与生物转化领域。本发明以1-苯基-2-甲氨基丙酮为转化前体,摩氏摩尔根氏菌为转化微生物,通过微生物培养、细胞收集、细胞固定化和生物转化步骤来生产d-伪麻黄碱。本发明的优点在于:1)直接利用微生物的转化作用生成d-伪麻黄碱,不需要化学拆分剂和化学拆分,既节省了成本,又利于环境保护;2)生物转化的效率高,专一性强,生成的d-伪麻黄碱e.e%>99.0%;3)工艺简单,降低生产成本,基本相同的工艺和设备也可生产其它麻黄碱,如l-伪麻黄碱。 |
申请公布号 |
CN101225417A |
申请公布日期 |
2008.07.23 |
申请号 |
CN200710191364.2 |
申请日期 |
2007.12.19 |
申请人 |
江南大学 |
发明人 |
石贵阳;张梁;丁重阳;王正祥;王国成 |
分类号 |
C12P13/00(2006.01);C12R1/01(2006.01) |
主分类号 |
C12P13/00(2006.01) |
代理机构 |
无锡市大为专利商标事务所 |
代理人 |
时旭丹;刘品超 |
主权项 |
1.一种微生物转化法生产d-伪麻黄碱的方法,其特征在于以1-苯基-2-甲氨基丙酮为转化前体,摩氏摩尔根氏菌CMCC(B)49086为转化微生物,通过微生物培养、细胞收集、细胞固定化和生物转化步骤来生产d-伪麻黄碱;(1)微生物培养:出发菌株:摩氏摩尔根氏菌(Morganella morganii)CMCC(B)49086;培养基组成以g/L计为:葡萄糖20~35,酵母膏3.5~5.5,蛋白胨20~35,K2HPO4 2~4,MgSO4·7H2O 0.1~0.3,NaCl 1~3,起始pH为7.0;培养条件:在发酵罐中装入发酵罐体积百分比60%~70%的培养基,灭菌冷却后接入摩氏摩尔根氏菌CMCC(B)49086,接种量为5%~15%,搅拌转速80~150r/min,通风量为1∶0.2~1∶0.5v/v/m,培养温度35~37.5℃,培养时间42~50小时;(2)细胞收集:将所获得的发酵液在10000r/min的条件下离心分离,分离得到的菌体用0.1mol/L的磷酸缓冲液洗涤两次,收集菌体;(3)细胞固定化:收集的菌体加入到质量浓度2.5%~5.5%的海藻酸钠溶液中,混合均匀形成菌悬液,使溶液中的细胞浓度达到3×1010~6×1010个/mL,并静置2h,通过流动泵将菌悬液以0.5mL/min的速度滴加到2~3倍体积0.2mol/L CaCl2溶液中,4℃固定过夜;倒去CaCl2溶液,并用水冲洗海藻酸钙小球,洗去残留小球表面的CaCl2溶液,得到固定化细胞;(4)生物转化:转化液组成以质量百分含量计为:1-苯基-2-甲氨基丙酮0.02%~0.2%,葡萄糖0.5%~6%;将固定化细胞装入层析柱,转化液每小时进入层析柱的流量为层析柱体积的1/10~1/25;转化温度25~45℃。 |
地址 |
214122江苏省无锡市蠡湖大道1800号 |