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<p>Un ensayo para determinar la capacidad de una muteína antagonista de IL-4 humana recombinante, numerada de acuerdo con la IL-4 tipo salvaje, que comprende al menos una sustitucion de aminoácidos R121D, Y124D, y una sustitucion adicional en la posicion seleccionada del grupo que consiste de 13, 16, 81 y 89, en donde dicha muteína se une con el receptor IL-4 R con al menos una afinidad del 50% mayor que una muteína IL-4 doble enumerada de acuerdo con la IL-4 del tipo salvaje que tiene las sustituciones R121D e Y124D para conjugarse con un receptor, caracterizada porque comprende los pasos de: (a) introducir en una placa Flashplate« revestida con estreptavidina, la porcion conjugante de una cadena receptora; dicha porcion conjugante de una cadena receptora contando con una oreja péptida capaz de ser conjugada por la estreptavidina; (b) introducir dentro de dicha placa FlashPlate un ligando nativo radiomarcado con afinidad por dicha porcion conjugante de una cadena receptora; (c) Introducir dentro de dicha placa FlashPlate un ligando muteínico con afinidad por dicha porcion conjugante de una cadena receptora; (d) Medir la cantidad de senal emitida por la placa FlashPlate después de permitir que se equilibre, y (e) Calcular la afinidad relativa del ligando muteínico frente al ligando nativo.</p> |
