烟草马铃薯Y病毒田间快速检测试纸条的制备方法

摘要

本发明公开了一种烟草马铃薯Y病毒田间快速检测试纸条的制备方法，包括制备抗体、制备胶体金、制备胶体金－抗体结合物、制备硝酸纤维素膜和制备胶体金层析检测试纸的步骤。采用上述技术方案制备的烟草马铃薯Y病毒田间快速检测试纸条，检测适温15～35℃，检样量0.1～0.3g、相当于烟叶面积大约3～5cm²的样品，将烟叶在装有缓冲液的塑料袋中研磨后，将试纸条浸入，30min出结果；假阳性率低于1％。可见本发明使用方便，特别适用于田间快速检测，并且可靠性很高。

主权项

1.一种烟草马铃薯Y病毒田间快速检测试纸条的制备方法，包括制备抗体、制备胶体金、制备胶体金-抗体结合物、制备硝酸纤维素膜和制备胶体金层析检测试纸的步骤，其特征在于：在制备抗体的步骤中，要制备兔多克隆抗体：用无菌生理盐水将烟草马铃薯Y病毒抗原稀释为2mg/ml，然后加Freund’s佐剂，第一次为完全佐剂，以后用不完全佐剂；抗原注射量为0.1～0.2mg/kg，选用2～3Kg的兔子，采取静脉注射方式，分三次完成，每次注射抗原用量0.03～0.1mg，间隔时间为10d，末次注射10d后进行放血，放血前动物禁食12h，采用耳静脉放血40～60ml，收集后离心除去血细胞，纯化后零下20℃保存；并用同样的方法制备羊抗兔抗体。