植物根系分泌物低分子量有机酸的检测方法

摘要

本发明属于农业生产技术领域中植物根系分泌低分子量有机酸检测方法。本发明改进了传统测量低分子量有机酸成份及迹量，增加检测有机酸的成份，提高检测迹量，并在纯化的过程中对被纯化物进行分离浓缩，将纯化的过程与检测融为一体，最终获得多组分、高精度低分子量有机酸，从而更好的满足科研需要。

主权项

1.一种植物根系分泌物低分子量有机酸的检测方法，其特征在于采用阳阴树脂作为固相萃取，将纯化的过程与检测融为一体，最终获得多组份、低分子量有机酸，具体步骤如下：a.前期准备：配置收集液：800uM CaCl2和5uM H3BO4的混和液；流动相0.125M(NH4)2HPO4，用H3PO4调PH为2.1-2.5；标准酸样品配置，标准酸包括：琥珀酸、柠檬酸、L型右旋乳酸、丙二酸、L型左旋苹果酸、洒石酸和草酸，配置浓度为300mg/L；b.根系分泌物的收集：将植物根系洗净，放入200ml收集液，上午10:00-12:00收集2小时，低温保存，待纯化；c.纯化：称取5g型号为Amberlite IR-120B的阳离子树脂干法装入180mm×20mm树脂柱，串联一个装有2g型号为Dowex 1×8-200的阴离子树脂同规格的树脂柱，分别用10ml去离子水预淋树脂柱，虹吸收集液，先过阳离子，后经过阴离子；d.洗脱：用20-30ml 1M HCl洗脱阴离子树脂柱，收集洗脱液到50ml旋转蒸馏瓶中：e.浓缩：采用旋转蒸发器，40℃条件下旋转蒸干，然后用1000ul去离子水溶解后，放入冰箱，4℃保存待测；f.高压液相色谱分析条件：用长250mm，直径4mm的C18的分析柱，检测波长215nm；流动相0.125M(NH4)2HPO4，PH为2.1-2.5，流速0.8-1ml/min；记录速度：lcm/min；进样量20-25ul；g.进行检测。