食源性寄生虫病快速酶免疫检测方法及检测盒

摘要

本发明公开了一种食源性寄生虫病快速酶免疫检测方法及多孔检测盒，酶免疫检测用试剂包括抗原包被板A、酶结合物液B、洗涤液C、底物D、显色剂E、样品稀释液F、终止剂G、阳性对照品H及阴性对照品I，检测过程使用多孔检测盒，检测过程包括：样本稀释、加样反应、加酶反应和显色反应，抗原包被板A采用快速包被工艺，预先在通用聚苯乙烯微孔板上包被抗原，酶结合物B液添加分子量Mr为20000、6000的两种聚乙二醇，解决了现有检测方法操作时间长、操作烦琐、试剂不稳定和配套不完整等问题，具有速度快、操作方便、可靠性高和检测效果好等优点，用于猪囊虫、肺吸虫、肝吸虫和旋毛虫病的酶免疫检测。

主权项

1.一种食源性寄生虫病快速酶免疫检测方法，用于猪囊虫、肺吸虫、肝吸虫和旋毛虫病的酶免疫检测，其特征在于：酶免疫检测用试剂包括抗原包被板A、酶结合物液B、洗涤液C、底物D、显色剂E、样品稀释液F、终止剂G、阳性对照品H及阴性对照品I，检测过程使用多孔检测盒，具体过程包括：(1)样本稀释：用样本稀释液F将待检血清按体积比1∶50稀释，阴阳性对照血清同比例同步稀释，然后(2)加样反应：每孔加已稀释血清100ul，同时设阴性、阳性及空白对照各一孔，空白对照孔加入100ul样品稀释液F，37℃静置10分钟，甩去，每孔加洗涤液C一滴，立即用蒸馏水洗涤多次，甩去，拍干，再(3)加酶反应：加酶结合物B二滴，37℃反应10分钟，甩去，加洗涤液C一滴，立即用蒸馏水反复洗涤多次，甩去，拍干，最后(4)显色反应：加底物D和显色剂E各一滴，混匀，室温下放置2-3分钟，待阴性对照孔微呈蓝色时，加终止剂G一滴混匀，终止反应，肉眼观察浅于近于阴性对照为阴性，呈明显深于阴性对照的蓝色为阳性，用仪器判断：以空白对照调零于630nm读取0.D值，待检孔0.D值大于阴性对照2.1倍者为阳性，当阴性对照0.D值低于0.07时按0.07计算。