家蚕杆状病毒表达系统的分泌型供体质粒的构建方法

摘要

本发明公开了一种家蚕杆状病毒表达系统的分泌型供体质粒的构建方法。该质粒的构建是基于目前已有的供体质粒pFastBacHTa，b，c和杆状病毒转移载体pAcGP67-B，采用基因重组原理构建而成，具有强的蛋白质分泌能力为特征。该分泌型供体质粒的构建为能获得分泌的重组蛋白质创造了条件。

主权项

1.家蚕杆状病毒表达系统的分泌型供体质粒pBmBacGP67a，b，c的构建方法，其特征在于：将pAcGP67-B质粒分泌转化人大肠杆菌DH5感受态细胞，随后进行质粒抽提，并进行EcoRV和HindIII双酶切处理，分离获得带有多角体启动子Ph启动子、gp67信号肽序列和多克隆位点的基因片段，大小为377bp；并对现有供体质粒pFastBacHTa，b，c进行SnaBI和HindIII酶切处理，切除原有的多角体启动子Ph启动子及其多克隆位点，并与上述377bp的片段相连，产生一个供体质粒pBmBacGP67a，b，c。