无特定病原对虾零换水苗种生产方法

摘要

一种无特定病原对虾零换水苗种生产方法，其操作程序是：首先首先是前期的准备，主要包括培育苗种海水消毒剂处理、苗种培育桶等器具的消毒和生物饵料的培养；其次进行亲虾的人工培育、集卵和幼体选优及消毒；同时用特定病原检疫技术对使用的鲜活饵料和集取的无节幼体进行严格的病原测试，结果阴性者继续培育；然后调整各家系放养密度，人工控制环境条件，并根据发育阶段阶段对理化环境及饵料要求，采用合适和适量的动、植物饵料和优质饲料。本技术操作规程简单，适合应用于大规模苗种生产，对虾苗种生产无特定病原率达100％，向对虾养殖企业提供SPF亲虾和SPF苗种或高健康苗种。

主权项

1.一种无特定病原中国对虾零换水苗种生产方法，其特征在于它的方法，包括：(1)、前期的准备；(2)、生物饵料的培养；(3)、苗种的培育；(1)、前期的准备，包括：A、培育苗种海水消毒剂处理；B、苗种培育池的消毒；A、培育苗种海水消毒剂处理：培育苗种海水经沙滤和80目过滤袋二次过滤，用有效氯达0.2-0.3×10-6的含氯消毒剂处理，经曝气水中余氯消失后方可使用；B、苗种培育池的消毒：将苗种培育池用浓度为200ppm漂白粉洗刷内壁，用消毒海水冲洗干净后晒干待用；(2)、生物饵料的培养，包括：A、饵料池的消毒；B、培养生物饵料海水的消毒；C、小球藻培养液的配制；D、金藻培养液的配制；E、轮虫培养；F、卤虫脱壳孵化；A、饵料池的消毒：将饵料池的四壁和底部用铁刷洗刷干净，用沙滤海水冲洗，再以NaClO∶H2O＝1∶500稀释的次氯酸钠对四壁和底部进行消毒，然后用沙滤海水冲洗干净；B、培养生物饵料海水的消毒：在每个饵料池中，将经过沉淀和沙滤的海水用500目的筛绢网过滤，每立方过滤海水中加入300ml有效氯含量8-12％的次氯酸钠溶液，搅拌混匀；充气6～8小时后，再在其中加入硫代硫酸钠30克，以中和余氯；C、小球藻培养液的配制：在上述消毒的每立方海水中依次加入溶解的尿素60克、溶解的磷酸二氢钾5克、浓度10％的柠檬酸铁溶液1ml，搅拌混匀；D、金藻培养液的配制：在每立方消毒海水中依次加入溶解的NaNO360g、溶解的KH2PO44g、浓度10％的柠檬酸铁溶液50ml、溶解的维生素B1 100毫克、溶解的维生素B12 0.5毫克；E、轮虫培养：在温度25℃、盐度27～28‰、小球藻培养密度达到1000～1500万/ml的消毒海水池中，接轮虫50个/ml，第二天开始投喂面包酵母，每亿轮虫分4～6次投喂融化鲜酵母200g；F、卤虫脱壳孵化：卤虫卵放入盐度27～28‰海水中，每升海水加100克左右的卤虫卵浸泡3～4小时；首先上述浸泡卤虫卵的每升海水加入13克固态NaOH；然后在其中加入500ml有效氯含量8-12％的次氯酸钠溶液；迅速置于流水中冷却，不断摇动混匀；20分钟后，混合物变为红色或粉红色，将混合物倒入消毒海水中；100目滤袋滤出卵；用消毒海水洗涤3遍即可孵化；孵化液表面的光照在2000勒，孵化16小时孵化出，用消毒海水洗涤3遍即可投喂；卤虫孵化温度28～30℃；(3)、苗种的培育包括：A、亲虾的人工培育；B、集卵；C、幼体选优及消毒；D、病原检测；E、第一次幼体培育密度调整；F、第二次幼体培育密度调整；G、对虾出苗；A、亲虾的人工培育：亲虾入池前用福尔马林消毒，培养用水用沙滤水并经有效氯含量达0.2-0.3×10-6的含氯消毒剂处理，体长15cm以上、身体饱满、弹跳力强、无外伤、纳精囊洁白饱满的人工培育成熟亲虾，按照性腺发育情况的好差，分别饲养；其中，对性腺发育差即性腺为黄色在背部呈细条状的雌虾采用摘除眼柄的方法促熟，性腺发育好即性腺扩展到背部两边，有较大侧叶的雌虾进行精荚移植，3-4天后放入室内的育苗池中；已交尾亲虾性腺发育到第四期，直接放到育苗池中；亲虾性腺发育到第四期，即产卵开始前，每个育苗池中加入2ppm乙二胺四乙酸，连续充气，水温为15℃，投喂经检测不携带特定病原体的鲜活沙蚕，投喂量为对虾总体重的10％；用遮光帘遮光；B、集卵：亲虾产卵后，将亲虾捞出，用有效氯含量达0.2-0.3×10-5的含氯消毒剂处理过且不含余氯的沙滤水充分清洗虾卵，并不断冲洗去除粪便、残饵等污物，并每隔2h用搅卵器搅卵一次，充气量调到气流刚好达到水表面即可；36小时后，卵孵化成无节幼体；C、幼体选优及消毒：孵化结束后，停止充气，待死卵和污物全部沉于池底后，用虹吸法吸取表层无节幼体；再用有效碘浓度为5×10-6PVP碘消毒处理30秒，在经消毒海水清洗1-2分钟后移入育苗池内培育；D、病原检测：利用核酸探针法和PCR法进行病原体的检测，对孵化为无节幼体的各家系取样进行病原检测，结果为阴性的家系继续培育，检测为阳性的家系弃之；在亲虾和幼体培育过程中使用的鲜活饵料，如沙蚕、轮虫、卤虫等均需抽样检测；E、第一次幼体培育密度调整：受精卵孵化成无节幼体后记为第一天，进行第一次幼体培育密度调整，每个家系幼体以每立方水20万尾密度放入育苗池中，温度每天升高2℃，最后稳定至24℃；第一次幼体培育密度调整后，投0.3ppm利福平，以抑制细菌的繁殖，保持良好的水质；第一次幼体培育密度调整程序：充气至整育苗池成沸腾状把整池的无节幼体打匀，用200L的烧杯从中间和边上各取三杯，计取杯中数量，计算无节幼体密度后，利用外推法求出幼体总数，然后用吸管吸出所需的量，使其达到每立方水20万尾幼体的密度；在苗种培育的第6天，即由无节幼体变成蚤状幼体，投喂金藻，浓度保持在1万个细胞/ml，到第10天后停止投喂；第7天幼体完全变为蚤状幼体，投喂轮虫，保持在3个/ml，到第12天即变成糠虾幼体后停止投喂；第8天即蚤状幼体第三天，投喂0号颗粒饵料，用100目的网过滤，投喂量为每万尾幼体0.1g/次，每天投喂4次；水温保持在24℃；在苗种培育的第11天，投喂卤虫，保持3ml一个卤虫幼体；第12天改投1号颗粒饵料，用80目的网过滤，投喂量为每万尾幼体0.15g/次，每天投喂4次；水温保持在24℃；F、第二次幼体培育密度调整：在苗种培育的第16天，进行第二次幼体培育密度调整，即把原先育苗池中的幼体进行分池，以每立方水10万尾的密度放入育苗池，并继续投1号颗粒饵料，用80目的网过滤，投喂量为每万尾幼体0.66g/次，每天4次，投喂卤虫，保持3ml一个；水温保持在24℃；第二次幼体培育密度调整程序：充气至整池成沸腾状把整池的幼体打匀，用200L的烧杯从中间和边上各取三杯，计取杯中数量，计算幼体密度后，利用外推法求出幼体总数，然后用吸管吸出所需的量，使其达到每立方水10万尾幼体的密度；G、出苗：在苗种培育的第25天虾出苗，在每天水温下降低于1℃情况下，逐步降至室温出苗。