摘要 |
Un método de identificación sistemática en busca de agentes antibacterianos potenciales, que comprende: (1) proporcionar una preparación de membrana obtenida a partir de una cepa bacteriana, en el que la preparación de membrana carece de actividad de peptidoglucano transpeptidasa; (2) preparar una mezcla de reacción que comprende la preparación de membrana, un UDP-N-acetilmuramilpentapéptido, una UDP-N-acetilglucosamina marcada radiactivamente, y una fuente de iones metálicos divalentes; (3) incubar la mezcla de reacción durante un periodo definido, en condiciones adecuadas para que se produzca la síntesis del péptidoglucado no reticulado; (4) añadir la mezcla de reacción de la etapa (3), (a) una fuente de peptidoglucano transpeptidasa, para permitir la síntesis del peptidoglucano reticulado, y (b) un compuesto de ensayo; (5) después de un periodo definido, añadir a la mezcla de reacción de la etapa (4) un agente fluorescente soportado por, en o sobre un sustrato capaz de unirse alas paredes de la células bacterianas, y un detergente; y (6) medir la energía luminosa emitida por el agente fluorescente, la cual es indicativa de la presencia de peptidoglucano reticulado marcado radiactivamente.
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