一种鼠李糖脂生物发酵液的工业化制备方法

摘要

本发明涉及一种鼠李糖脂生物发酵液的制备方法。该方法包括下列步骤：在石油污染的土壤中提取并经过分离纯化得到的铜绿假单胞菌，该菌种经亚硝基胍诱变后得到铜绿假单胞菌VTS－1(Pseudomonas sp.VTS－1)保藏编号为：CGMCC2200，具体发酵培养步骤如下：A.菌种VTS－1接入摇瓶培养；B.一级发酵培养；C.二级发酵培养；D.发酵培养。该方法工艺具有产量高、效率高、装料系数高、发酵周期短、工艺简单，使产品综合成本降低，完全适合工业化生产，对鼠李糖脂生物表面活性剂的推广及大规模应用起到了重要的作用。

主权项

1.一种鼠李糖脂生物发酵液的制备方法，其特征在于：该鼠李糖脂发酵液是由在石油污染的土壤中提取并经过分离纯化得到的铜绿假单胞菌再经亚硝基胍诱变后得到铜绿假单胞菌VTS-1(Pseudomonas sp.VTS-1)保藏编号为：CGMCC2200，具体发酵培养步骤如下：A、菌种VTS-1接入摇瓶培养，温度为32±2℃、120转/分震荡培养12～16小时，得到摇瓶菌种；B、一级发酵培养：将A步骤中的摇瓶菌种按5％～10％的接种量转接入装有培养基的一级发酵罐中，在温度为32±2℃、pH6.5～7.5、通风比1∶0.5～1及搅拌速度为100～150转/分的条件下发酵培养10～18小时，得到一级发酵菌种；C、二级发酵培养：将B步骤中的一级发酵菌种按5％～10％的接种量转接入装有培养基的二级发酵罐中，在温度为32±2℃、pH6.5～7.5、通风比1∶0.5～1及搅拌速度为100～150转/分的条件下发酵培养10～18小时，得到二级发酵菌种；D、发酵培养：将C步骤中的二级发酵菌种按5％～10％的接种量转接入装有培养基的三级发酵罐中，在温度为32±2℃、pH6.5～7.5、通风比1∶0.5～1、搅拌速度为100～150转/分及补料条件下发酵培养45～55小时，再进行80℃灭菌得到鼠李糖脂发酵液。